牡丹愈伤组织继代培养的.研究

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1、河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论学位文题目牡丹愈伤组织继代培养的研究级别硕士学学生科园林植物与观赏园导师姓名牛佳佳何松林教授专艺，姓名业学位论文冱如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明’研究生签名：坪毪理导师签名；莎p承f日期：W9年歹月细日日期：汕7年。彳月彦日学位论文使用授权及知识产权归属承诺本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷本和电子版本，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、

2、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人完全了解《河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定，在毕业离开河南农业大学后，就在校期间从事的科研工作发表的所有论文，第一署名单位为河南农业大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南农业大学所有，否则，承担相应的法律责任。注：保密学位论文在解密后适用于本授权书。．)，1≥日期：油仁F易月

3、D日蓄凳霈乌／‘裂双启如日日期：渊月／含日致谢本论文是在导师何松林教授的悉心指导下完成的。从论文

4、设计、实验操作、数据的组织和整理以及论文的写作等，无不倾注着何老师的大量心血和汗水。何老师渊博的知识、严谨的治学态度、谦恭随和的处事是我永远学习的楷模!值此论文付梓之际，谨向恩师致以崇高的敬意和衷心的感谢!感谢杨秋生教授和苏金乐教授在论文的立题和成文过程中给予了宝贵的意见；孔德政副教授和李永华副教授在试验的进行过程中给予的大力支持，及园林系的所有老师，在此一并谢过!在试验进行过程中，得到了博士师兄王政，师姐符真珠，同学闫新房、李高燕、贺丹，师妹吴静、王海云、丁义、徐盼，师弟郑卫杰，本科生徐雅的全力帮助。同时感谢林学院2

5、006级研究生同学三年来在生活和学习上给予我的帮助和照顾，是你们的帮助和鼓励，给了我信心和勇气去克服一个又一个的困难!最后我要衷心的感谢我的父母和所有朋友，是他们给予了精神上的支持和物质上的帮助，使我得以顺利的完成我的学业。同时感谢对论文评阅、答辩和提出宝贵修改意见的所有师长、同学表示真挚的谢意!感谢所有关心、支持和帮助过我的老师、朋友和同学们!请你们再次接受我最诚挚的谢意!牛佳佳2009年6月河南农业大学硕士学位毕业论文【文献综述】1．文献综述1．1牡丹组织培养综述牡丹(Paeoniasuffruticosa)为芍药

6、科芍药属牡丹组多年生灌木花卉，是我国著名的观赏、药用植物。牡丹苗木生产一直沿用无性繁殖方式，一是为了保持母株的遗传性状基本不变，二是重瓣花品种不结实，只能以无性方式繁殖。由于传统繁殖方法存在结实能力低下、种子变异性强、无性繁殖系数低等问题，繁殖方法的滞后限制了牡丹种质资源保存及新品种选育工作的开展⋯。这促使人们不懈地研究牡丹规模化苗木生产的技术，采用组织培养是牡丹快速繁殖的最有效手段之一。植物组织培养技术可克服传统繁育方法的不足，在短期内大量扩繁优良品种，并能够为利用遗传转化技术在短期内定向改良、培育牡丹新品种提供再生

7、体系。牡丹的组织培养研究始于1965年。Demoise和Partanen[2l在1969年分别通过剥离牡丹种子的合子胚诱导出了愈伤组织。我国最早关于牡丹组织培养的报道是1982年李玉龙【31对洛阳黑牡丹等品种的研究，并初步取得成功。迄今为止，关于牡丹组织培养的研究主要集中在鳞芽培养、胚培养、愈伤组织培养、上胚轴、茎、花药与花粉等方面，并取得了一定的进展。但在生产工艺上还存在外植体污染率高、褐化严重、生根与移栽成活率低等问题。这使得以组织培养培方式繁殖牡丹还难以成为可行的商业化生产方式【41。牡丹的组织培养过程中有很多的

8、影响因素，如外植体的种类，取材时间，取材位置，环境因素(光照强度，光照时间，温度，湿度)，生长调节剂(生长激素的种类以及生长素与细胞分裂素的比例)，活性炭、糖分等等的影响。1．1．1外植体的遗传因素外植体的遗传因素是影响植株再生的重要因素，包括外植体种、品质及其基因型。从大的分类单位来看，不同科属培养要求的条件有很大差别，同一属中不同种的植物在相同的培养条件下其表现也有很大的差异。据不完全统计，目前全国约有牡丹园艺品种1500种，包括4大品种群，各个品种群之间生态习性和生物学特性存在差异，如李玉龙【3】以黑牡丹类型的‘

9、青龙卧墨池’和杂交新品种‘18号’为材料时，2个品种都能产生大量的丛生芽；张桂花等【51以‘黑花魁’、‘豆绿’、‘金星雪浪’和‘大胡红’为材料诱导丛生芽时，‘金星雪浪’和‘大胡红’诱导分化出的丛生芽数量较多、增殖系数较高能分化出4～5个芽丛，而‘黑花魁’和‘豆绿’的增值率相对较低仅分化出1～2个芽丛；孔祥生【61等以‘姚黄’、‘胭