kctd15基因调控3t3-l1脂肪前体细胞分化的研究

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1、第３５卷第１１期第三军医大学学报Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１１２０１３年６月１５日ＪＴｈｉｒｄＭｉｌＭｅｄＵｎｉｖＪｕｎ．１５２０１３１１１５文章编号：１０００５４０４（２０１３）１１１１１５０４论著ＫＣＴＤ１５基因调控３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞分化的研究１２２１１徐景，赵旭，杨莹，徐梓辉（４０００３７重庆，第三军医大学新桥医院内分泌科；１０００２９北京，中国科学院北京基因２组研究所重大疾病基因组和个体化医疗实验室）［摘要］目的探讨含钾通道四聚化结构域１５（ＫＣＴＤ１５）基因在３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞分化过程中的作用。方法①采

2、用半定量逆转录ＰＣＲ检测在３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞分化过程中ＫＣＴＤ１５ｍＲＮＡ表达变化。②在３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞增殖早期通过ＲＮＡ干扰技术靶向敲低ＫＣＴＤ１５基因的表达，在靶向敲低ＫＣＴＤ１５基因后的转染ＫＣＴＤ１５ｓｉＲＮＡ４８ｈ后通过半定量逆转录ＰＣＲ验证ＫＣＴＤ１５基因的敲低效果。用油红Ｏ染色法观察ＫＣＴＤ１５敲低后３Ｔ３Ｌ１细胞第０天和第１０天的细胞形态学改变。③采用半定量逆转录ＰＣＲ检测ＫＣＴＤ１５基因敲低后ＰＰＡＲγ、Ｃ／ＥＢＰα、Ｃ／ＥＢＰβ、Ｃ／ＥＢＰδ成脂基因的变化。结果在３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞分

3、化过程中，ＫＣＴＤ１５ｍＲＮＡ表达水平逐渐降低（Ｐ＜０．０５）；ＫＣＴＤ１５敲低能显著抑制３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞分化；ＫＣＴＤ１５敲低后ＰＰＡＲγ、Ｃ／ＥＢＰα、Ｃ／ＥＢＰβ、Ｃ／ＥＢＰδ成脂基因无明显变化。结论在分化早期阶段敲低ＫＣＴＤ１５基因能抑制３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞分化。［关键词］ＫＣＴＤ１５基因；３Ｔ３Ｌ１脂肪前体细胞；细胞分化；肥胖［中图法分类号］Ｒ３９２．２；Ｒ３９４３３；Ｒ３９４．２［文献标志码］ＡＰｏｔａｓｓｉｕｍｃｈａｎｎｅｌｔｅｔｒａｍｅｒｉｓａｔｉｏｎｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ１５ｒｅｇ

4、ｕｌａｔｅｓｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ１２２１１ＸｕＪｉｎｇ，ＺｈａｏＸｕ，ＹａｎｇＹｉｎｇ，ＸｕＺｉｈｕｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，ＸｉｎｑｉａｏＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００３７；ＤｉｓｅａｓｅＧｅｎｏｍｉｃｓａｎｄＩｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄＭｅｄｉｃｉｎｅＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＢｅｉｊｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＧｅｎｏｍｉｃｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅ

5、ｉｊｉｎｇ，１０００２９，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｐｏｔａｓｓｉｕｍｃｈａｎｎｅｌｔｅｔｒａｍｅｒｉｓａｔｉｏｎｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ１５（ＫＣＴＤ１５）ｇｅｎｅｏｎｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＫＣＴＤ１５ｇｅｎｅｄｕｒｉｎｇ３Ｔ３Ｌ１ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｓｅｍｉｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ

6、ａｓｅＰＣＲ．ＡｆｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇＫＣＴＤ１５ｓｉＲＮＡｉｎｔｏｔｈｅｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ，ｔｈｅｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｄｕｒｉｎｇｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｂｙｏｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇ，ａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙａｓｓａｙｋｉｔ．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓｇｅｎｅｓ，ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＰＰＡＲ）γ，ＣＣ

7、ＡＡＴ／ｅｎｈａｎｃｅｒｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ（Ｃ／ＥＢＰ）α，Ｃ／ＥＢＰβａｎｄＣ／ＥＢＰδｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｓｅｍｉｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅＰＣＲ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＫＣＴＤ１５ｇｅｎｅｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｄｕｒｉｎｇ３Ｔ３Ｌ１ｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＫＣＴＤ１５ｇｅｎｅｋｎｏｃｋｄｏｗｎｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｌｉｐｉｄａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆ３Ｔ３Ｌ１ｃｅｌｌｓ，ａｎｄｔ

8、ｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｈａｎｇｅｉｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＰＰＡＲγ，Ｃ／ＥＢＰα，Ｃ／ＥＢＰβａｎｄＣ／ＥＢＰδ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＫＣＴＤ１５ｇｅｎｅｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｌｅａｄｓｔｏｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ３Ｔ３Ｌ１ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆ