wnt-3a信号蛋白对内源性神经干细胞在损伤脊髓内增殖分化影响在体实验的研究

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1、安徽医科大学硕士学位论文英文缩写B棚CNSSCIF1TC11；uTC雠心MAP-2NSCsPBSBⅧCNSgefWDHLEGFbFGFNestinAPCGSK3TCF／L】!FPLLNCSC英文缩略词表英文全名5-BromodeoxyuridinesCentralnervoussystemSpinalcord埘uryf．uoresceinesothiocyanateTetraethylrhodamineisothioeymtcglial矗brillaryacidicproteinmierotubule-associa

2、tedproteinⅡIleuralstemcellsphosphatebufferedsalineBonemorphogeneticproteinscentralnervoussystemgranl-ffnlforceWeightdropHindlimbEpidermalgrowthfactorbasicfibroblastgrowthfactorneuroepithelialstemcellproteinadtellolnatouspolyosiscoliglycogensynthasekinase-3Tcell

3、transcriptionfactor／lymphoidenhancerfactorpoly·lqysineneuralcreststemceUs中文全名5一溴脱氧尿嘧啶核苷中枢神经系统脊髓损伤异硫氰酸荧光素四乙基罗丹明异硫氰酸盐胶质纤维酸性蛋白微管相关蛋白一2神经干细胞磷酸缓冲液骨形成蛋白中枢神经系统克厘米力重物坠落法后肢表皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子巢蛋白大肠腺瘤样息肉蛋白糖原合成激酶一3T细胞转录因子／淋巴样增强因子多聚赖氨酸神经嵴干细胞学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师下进行的研究工作及取得

4、的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名：么塑!垒学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留，使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的少量复制并允许论文进行学校图书管被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用

5、本规定。学位论文作者签名多私：艮日期卿川三一安徽医科大学硕士学位论文Wnt-3a信号蛋白对内源性神经干细胞在损伤脊髓内增殖分化影响的在体实验研究中文摘要目的：制备大鼠脊髓损伤模型，研究Wnt-3a信号蛋白对脊髓损伤修复作用；探讨瓢t一3a信号蛋白激活Wnt信号途径，促进内源性神经干细胞增殖分化的作用机理。方法：①成年雌性s．D大鼠40只，体重200-2509，分成两组：对照组(Groupl，n=20)，Wnt一3a信号蛋白治疗组(Group2，n=20)。②利用Allen法在TIO节段制备大鼠脊髓损伤模型；实验组脊髓

6、损伤后3天在损伤区域注入Wnt-3a蛋白重组体，对照组在同样区域注入等量生理盐水。③脊髓损伤后24小时，7、14、21、28天进行BBB(Basso-Beattie—Bremahan)评分检测脊髓损伤后大鼠行为学改变。④分别在脊髓损伤后14天．28天处死等量动物(n=4)，4％多聚甲醛灌注固定，石蜡包埋、切片后，呱染色，光镜下比较两组间脊髓组织形态学变化；为观察两组间脊髓损伤后超微结构的变化，需将损伤节段脊髓先固定于2．5％的戊二醛中，透视电镜下观察结果。⑤同样在脊髓损伤后14天．28天处死等量动物(n=4)，灌注前

7、48小时腹腔注射5一溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)，常规冰冻切片后，行免疫荧光组织化学方法，观察内源性神经干细胞的存活、增殖、分化等情况。BrdU标记增殖的神经干细胞；姒P-2标记神经元；GFAP标记星形胶质细胞；随机计数8个400倍镜下视野下BrdU+／MAP一2+双阳性细胞数或BrdU+／GFAP+双阳性细胞数，取平均值获得结果。结果：①脊髓损伤后14天，Wnt一3a蛋白治疗组BBB评分开始高于对照组，差异具有显著性(实验组：10．32__-i．12，对照组：8．64+_1．00；p

8、科大学硕士学位论文后28天，两组之间的差异性更加明显(实验组：16．94+1．18，对照组：9．89±1．29：p