猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠骨密度和相关生化分子影响

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1、授予单位代码10459学号或申请号密级公开郑士州学位大学论硕文(科学学位)猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠骨密度和相关的生化分子的影响院系名称:基础医学院学科门类:医学专业名称:生物化学与分子生物学作者姓名:李逢春导师姓名、职称:安玉会教授鲍玉洲研究员二零零八年十一月郑州大学2008届硕士学位论文猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠骨密度和相关的生化分子的影响猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠骨密度和相关的生化分子的影响硕士学位申请者:李逢春推荐导师:安玉会教授鲍玉洲研究员郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室郑州450052摘要目的:通过测定骨密度及相关各项指

2、标探讨猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠的影响。方法:本实验采用大鼠糖皮质激素骨质疏松模型及骨损伤模型，对猪骨蛋白的抗骨质疏松作用进行实验研究。研究方法是:(1)将3月龄Wistar大鼠60只随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药组、骨蛋白高剂量组、中剂量组、低剂量组。空白对照组，按10m掀g每天灌胃给予蒸馏水;模型组，按2.5m呱g每周两次肌肉注射地塞米松;骨质疏松模型猪骨蛋白高剂量组，按Zoomg/kg每天灌胃给予猪骨蛋白;中剂量组，100m叭g每天灌胃给予猪骨蛋白，低剂量组，按50m叭g每天灌胃给予猪骨蛋白;阳性药组，按300m叭g每天灌胃给予

3、接骨七厘片。除空白组外，其余各组肌肉注射地塞米松2.5m叭g，每周两次，连续注射6周造成骨质疏松模型。连续给药12周后，取血、尿用于测定血钙(Ca)、磷(P)和碱性磷酸酶(ALP);放射性免疫法测定血清骨钙素(BGP)的含量以及尿钙(Ca)、尿磷(P)、尿肌醉(Cr)和尿轻脯氨酸(HOP)的含量。实验结束后取大鼠胫骨检查骨密度。处死时留取胫骨制作脱钙骨切片做骨组织形态计量学分析。(2)取Wistar大鼠60只，制成胫骨骨损伤模型，随机分为6组:模型组，阳性组，高剂量组，中剂量组，低剂量组，每组均为20只大鼠。空白组每日灌胃给予10m呱g蒸馏水，

4、阳性组每日给予300m岁kg接骨七厘片，高剂量组每日给予ZO0m眺g猪骨蛋白，中剂量组每日给予1oom叭g猪骨蛋白，低剂量组每日给予50m叭g猪骨蛋白。连续给药20d后，取一半大鼠胫骨进行放射学观察和骨痴组织学观察，另一半大鼠继续给药，40d后，取剩余大鼠胫骨进行放射学观察郑州大学2008届硕士学位论文猪骨蛋白对骨质疏松模型大鼠骨密度和相关的生化分子的影响和骨痴组织学观察。本实验数据利用SPSs13.O统计软件包进行统计，尸<0.05表示统计学上差异有显著性。结果:(l)骨蛋白高、中和低剂量组血磷含量分别为:2.28约.35mmol/L2.34

5、士0.32mmol压和2.29士0.30mmo呱，均比骨质疏松模型组明显降低(2.61士0.23mmol几)(尸<0.05);碱性磷酸酶(ALP)含量分别为:94.50士19.79U/L，102.1士23.96U/L和110.1士23.53U几，均明显比骨质疏松模型组降低(137.9士23.99U/L)(P<0.05);血清骨钙素含量分别为:1.69士0.27n叭，1.80士0.加n叭和1.73士0.17n留L，均比骨质疏松模型组明显降低(1.97士0.24n泌)(p<0.05);骨蛋白高、中和低剂量组尿钙(肌醉)和尿经脯氨酸(肌醉)含量分别为

6、:0.16士0.05mmol枷mol/0.20士0.0和脚mol，0.18士0.04mmol/Pmo如.24士0.0和g/Pmol和0.22士0.04mmol/Pmol/0.25士0.0和脚mol，分别明显低于模型组(0.27士0.08mmol/ymol/0.29士0.o7lt脚mol)(p<0.05)。各组血钙，尿磷肌醉(P/Cr)均无显著性改变。骨质疏松模型组大鼠胫骨骨密度值比模型组低(尸<0.01);阳性对照组和骨蛋白三个剂量组骨密度值(0.150士0.015岁cmz，0.152士0.015岁cmZ和0.145，0.013岁cmZ)均比模

7、型组(0.136土0.012g/emZ)高(尸<0.05)。高剂量和中剂量的骨小梁厚度分别为:48.73土12.2加ml，48.17土10.2即ml，均比模型组(36.23士12.2加ml)的大(尸

8、骨细胞比模型组活跃且骨小梁生长的比较好。给药40d后，放射学结果显示:猪骨蛋白高、中剂量组的骨折线基本愈合，模型组的仍然清晰可见;组织学结果显示:猪骨