同种异体肋软骨细胞修复兔膝关节全层软骨缺损的分析

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1、1．3．8肋软骨刍H胞染色．．⋯．⋯．．．．．．．⋯⋯．．⋯，．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．131．4讨1念．．⋯．⋯．．．．．．⋯．．⋯⋯．⋯．⋯．．．⋯⋯．．．．．．．．．．．⋯．⋯131．5结论⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．．．．．．⋯．．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯，⋯．⋯162．肋软骨细胞复合透明质酸钠修复兔膝关节全层软骨缺损的实验研究．⋯⋯．172．1材料．⋯．．．．．⋯．．．．．⋯．．．⋯⋯⋯．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．⋯．⋯．．172．1．1动物及饲养⋯．．⋯．．⋯．⋯．．⋯⋯．⋯．．⋯⋯．．⋯．⋯．．⋯．．172．1．2动物实验主要物品及试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1

2、72．1．3各种液体的配置．．⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．．．⋯．⋯⋯．182．2实验方法．．．⋯．⋯．⋯．⋯．．⋯．⋯．．．．．⋯．．．⋯⋯．．．．．⋯．⋯．192．2．1种子细胞制备．．．⋯⋯．⋯．⋯．．⋯⋯．．．．．．．．．．⋯．⋯．．⋯．⋯192．2．2兔膝关节软骨缺损模型的制各⋯⋯⋯．⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．192．2．3实验动物的分组．⋯⋯．．．．．．⋯．⋯．．⋯．⋯．⋯．．⋯⋯．．⋯．．．192．2．4肋软骨细胞／透明质酸钠复合物的移植⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯192．2．5观察指标⋯．⋯．⋯⋯．．．⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯．．⋯．．⋯⋯202．3统计学处

3、理⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．4结果⋯⋯⋯．．⋯．⋯．．⋯⋯．⋯．⋯．．⋯．．．．．⋯．⋯．．．⋯⋯．232．4．1兔膝关节软骨缺损模型制备的手术过程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯232．4．2术后动物‘般情况．．⋯．⋯．⋯．．⋯⋯．．⋯．⋯．⋯．．⋯．．⋯⋯252。4。3标本的大体观察⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯．⋯．．⋯．．．252．4．4标本的病理组织学榆测⋯．⋯⋯．⋯．．⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯．．262．4．5软骨组织学评分。。⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯．．3l2．4．6统计学处理⋯⋯⋯．⋯．⋯．．．．．⋯．．⋯．⋯．⋯．．⋯．⋯．

4、⋯．．312．5讨论⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．332．6结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯37参考文献⋯⋯．⋯．．．．⋯⋯⋯．⋯．⋯．⋯．．⋯．⋯⋯．．⋯．．．⋯⋯38综述⋯．⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯．⋯．．⋯⋯．⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯43攻读学位期间主要的研究成果日录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52致谢⋯．．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯．．⋯_．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．53ⅥI缩略词表英文缩写词英文全称中文名称ACIAutologouschondrocyteimplantation白体软骨细胞移植BMSCsBonemarrowmesenc

5、hymalstemcellS骨髓问充质于细胞DMSOdimethylsulfoxideFBSfetalbovineserumGAGglycosaminoglycaniPSCsinducedpluripotentstemcellsMTTmethylthiazolyltetrazoliumMSCsmesenchymalstemcellsPSCspluripotentstemcellsPBSphosphatebufferRPMRevolution(S)PerMinute二甲基亚砜胎牛血清糖胺多糖诱导性多能干细胞噻唑蓝间充质干细胞多能干细胞磷酸盐缓冲液每分钟转数硕士学位论

6、文刚面前言创伤等多种原因造成的关节软骨缺损在临床上较为常见，并且发病率呈现逐年递增的趋势。由于关节软骨仅包含单一软骨细胞，无血液供应，神经组织及淋巴引流，仅靠关节液完成物质能量交换，软骨细胞少而细胞外基质丰富，局部祖细胞缺乏，所以关节软骨自我修复能力极差，几乎刁i能自行修复，甚至会导致负重的关节软骨进行性破坏和骨性关节炎，为继发骨关节疾病和关节不稳的主要原因，也是肢体残障的主要原因。现有治疗方案如自体骨软骨移植、同种异体骨软骨移植，骨膜或软骨膜移植和骨髓刺激技术等均是姑息性治疗方案，均未能达到软骨修复理想的“金标准”，因此关节软骨缺损的治疗一直是医学界没有攻克的瓶

7、颈。随着组织工程技术的不断进步，软骨组织工程技术为关节软骨缺损的修复治疗提供了一种崭新的方案，被认为是最有可能达到软骨修复理想“金标准”的治疗方案。目前唯一被临床应用于修复关节软骨缺损的细胞是自体关节软骨细胞，自体软骨细胞移植(Autologouschondrocyteimplantation，ACI)技术修复效果满意，但是具有细胞来源有限、供区并发症以及需要二次手术等缺点限制了其在临床上的广泛应用。近年来，人们正在努力探索其他可修复软骨的细胞源以弥补以上不足，如间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)、多能干细胞(pluripotent

8、stemc