结直肠癌和结直肠腺瘤中tip30基因表达影响凋亡的临床研究

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1、蔷参』●，』l●1目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文结直肠癌和结直肠腺瘤中TIP30基因表达影响凋亡的临床研究前言⋯?⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日U舌⋯?⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．·一14附图⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯·21讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·23结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一25综述TIP30／CC3基因与恶性肿瘤的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39个人简历⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·40中文摘要结直肠癌和结直肠腺瘤中TIP30基因表达影响凋亡的临床研究摘要近年来随着饮食结构的改变，在我国结直肠癌发病率呈快速上升趋势，严重威胁着人们的生命健康。目前结直肠癌的治疗主要采用手术结合放化疗的方法，但效果并不理想，主要与复发转移有关。肿瘤的发生和发展是多基因、多因素、多步骤综合作用的结果，其中包括肿瘤抑制基因在肿瘤的发生和发展中起的重要作用，因此肿瘤抑制基因及其作用机制是当今研究的热点之一。TIP30是新发现的一个肿瘤抑制基因，它在人类许多肿瘤的发生和发展

4、中起着重要作用。关于TIP30基因在结直肠癌中的具体作用机制目前还不清楚。为了明确TIP30基因在结直肠癌中的作用，我们采用半定量RT．PCR分析法研究了结直肠癌和结直肠腺瘤组织中的TIP30基因的表达情况，并结合临床病理资料进行分析，探讨其对结直肠癌发生发展及复发转移的影响。目的：旨在探讨TIP30基因在结直肠癌、结直肠腺瘤和正常组织中的表达差别以及对细胞凋亡的影响，结合患者临床病理资料分析TIP30基因表达水平在结直肠良恶性肿瘤生长和转移中的作用机制。方法：1采用半定量RT-PCR方法分别检测30例结直肠癌标本及其

5、正常粘膜以及结直肠腺瘤标本中TIP30mRNA的表达情况，对比分析正常结直肠粘膜、结直肠癌和结直肠腺瘤组织之间TIP30基因的表达差异，结合临床病理资料作相应统计学处理。2各组患者同时留取标本经10％中性福尔马林液固定，常规脱水，石蜡包埋切片，采用SP免疫组化方法，以羊抗人TIP30单克隆抗体分别测定各组标本TIP30蛋白的表达水平，实验结果作相应统计学分析。3各组患者同时留取流式细胞学检测标本以70％乙醇固定，酶解制成单细胞悬液，以流式细胞仪计数，应用DNA细胞周期分析软件，依据DNA分布组方图，计算出细胞周期各时相

6、分布的百分比，即Go／Gl、S和GdM期各占的百分比，并以此求出增殖指数(Proliferationindex．PI)表示细胞的增殖活性，同时测定各组标本细胞凋亡率，比较分析各组组织中文摘要细胞凋亡率的差异以及与TIP30基因表达的相关性。结果：l在正常肠粘膜、结直肠腺瘤、结直肠癌中TIP30mRNA的表达率分别为96．7％、83．5％、23．3％。TIP30基因在结直肠癌组织中的表达明显低于前二者，经统计分析有显著差异。测得的TIP30mRNA的表达水平结果为：结直肠癌组织TIP30mRNA的表达水平(O．255：圭

7、-0．056)明显低于正常粘膜组织的表达水平(O．475：生-0．073)(P<0．01)，而结直肠腺瘤组织中TIP30mRNA的表达(0．4144-0．053)较正常粘膜组织无明显差别(P>o．05)。但结直肠癌组织中的TIP301111州A的表达明显低于结直肠腺瘤(P

8、直肠黏膜及结直肠腺瘤之间的表达没有明显差异(P>0．05)。3结直肠正常粘膜、结直肠腺瘤和结直肠癌细胞的增值指数和凋亡率依次为20．579-4-2．160％、30．886-2：2．415％、45．8434-0．721％和35．547-4-2．787％、20．9364-2．883％、3．7344-0．115％，随着TIP30表达水平