f68及其联合dmso对脐血造血细胞低温保护作用的研究

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1、F68及其联合DMSO对脐血造血细胞低温保护作用的研究摘要本实验旨在研究蒈鲁兰尼克F68及其联合DMSO在一80℃条件下对脐血造血细胞的低温保护作用，为临床应用提供依据。脐血标本经比重为1．080的Percoll分离液分出单个核细胞后，按不同的冻存保护剂分成四组，即CP．1组、F68联合DMSO组、F68组及DMSO组，脐血单个核细胞悬液与冻存保护剂等比例混合后，将其直接放入．80℃冰箱，经冻存30、60、90天后在37℃的水浴中快速复苏，洗脱冻存液后，观察各组单个核细胞回收率，台盼蓝拒染率、不同集落的回收率

2、及3H．TdR掺入率等，以测定经不同保护体系冻存的脐血造血细胞活力：应用透射电镜观察冻存／复苏后的细胞超微结构改变。结果表明，在-80℃条件下，F68对脐血造血细胞具有冷冻保护作用，并与DMSO具有协同保护效果，联合F68及DMSO的冻存保护体系可使MNC、CFU．GM的平均回收率及台盼蓝拒染率在第90天对分别达到(83．4士6．3)％，(68．8±7．9)％，(92．5±5．1)％，优于目前通用的细胞低温冻存保护液CP-I及DMS0；三个月内，保存时间对脐血造血细胞的活力影响不大；透射电镜下可见：应用联合F

3、68及DMsO的保护体系，脐血细胞经冻存／复苏后的细胞损伤最轻。提示由F68与DMSO组成的这一新型低温冻存保护溶液对脐血造血细胞具有良好的冻存保护效果。关键词：普鲁兰尼克F68；造血细胞；脐血；低温保存_)<

4、lIEffectsofF68anditscombinationwithDimethylsulfoxideoncryopreservationofcordbloodhematopoieticstemcellAbstractnleaimofthisexperimentwastoinvestigatethe

5、effectsofPluronieF68anditscombinationwitllDMSOoncryopreservationofcordbloodhematopoieticstemcellunder·80℃andprovideevidenceforclinicalusage．nleMNCswereseparatedfromcordbloodbydensitygradientsof1．080Percoll，andweredividedintofourgroupsonthebasisofdifferentcr

6、yoprescrvationsolutionwhichwasCP．1，F68combinedwithDMSO，F68alone，andDMSOalone．Eachgroupcontaining10cordbloodsampleswasstoredin．80℃疗∞zcrfor90days．At30．60,90day,cellswerethawedandcellviabilityWastestedbyTypanblueexclusion,clonogenicpotentialand3H．TdRincorporat

7、ion．Cellmicrostructureswerealsoobservedunderelectronicmicroscopeattheendof90day．TheresultshowedthatF68alonehadcryoprotectiveeffectandthenewcryoprotectantcontaining5％F68．5％DMSoand4％Albhadthebestcryoprotectiveeffectcomparedtothecounterpartsof10％DMSOandCP-1．Af

8、tercryopreservationandthawing，MNCrecoverycanachieve(83．4士6．3)％．CFU-GMrecoveryCallachieve(68．8±7．9)％andviabilitybyTypanblueexclusionwas(92．5±5．1)％atthe90thday．Cellviabilityhadnosignificantdeclinewithin90days．Underelectronicmicroscope．1esscelldamageswereobser

9、vedingroupCP·2．ThestudyshowedthatF68anditscombinationwithDMSOhadidealprotectiveeffectsonthecryopreservationofcordbloodhematopoieticstemcell．Keywords：PluronicF68；Cordblood；IJHematopoieticstemceil；Cryopr