大豆肽的酶解制备与抗疲劳、抗氧化功能研究

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1、摘要已有研究表明，运动时的氧化应激反应是疲劳形成的重要原因。抗氧化剂能够缓解氧化应激、抗疲劳。大豆肽作为一种良好的外源性抗氧化剂，具有加工工艺简便、成本低廉、吸收迅速等特点。本实验主要研究大豆肽在实验动物体内抗疲劳与抗氧化活性，并讨论二者之间的关系。本文首先进行了大豆肽酶解工艺的选择。分别采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶Neutrase、中性蛋白酶(夏盛牌)、木瓜蛋白酶四种酶在其最适条件下进行水解，以水解度和清除自由基能力作为评价指标进行讨论。选择清除自由基能力最高的两种酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶)进行双酶同步、分步水解，得到两种大豆肽(A和B

2、)。分别按照O．89·dd·kg"1灌喂小鼠两种大豆肽、大豆分离蛋白，对照组灌喂等量生理盐水。每日一次，2周后进行负重游泳实验，讨论力竭游泳时间，并检测肝糖原、肌肉乳酸、乳酸脱氢酶、血尿氮、肝组织SOD等生理指标，比较其抗氧化和抗疲劳效果，并研究抗氧化指标与抗疲劳指标之间的关系。灌喂分子量较小的B组力竭游泳时间明显长于其它组，乳酸脱氢酶含量、肌肉乳酸生成量、血尿氮含量明显低于其他组，肝糖原、SOD活力明显高于其他组。SOD活力与力竭游泳时间之间具有线性关系。50只小鼠分成五组，分别按照0．59·dd·kg"1灌喂两种大豆肽、鹿血肽、大豆分

3、离蛋白，．对照组灌喂等量生理盐水。每日一次，3周后进行水迷宫实验、强迫游泳实验和定时游泳实验。结果表明大豆肽B组小鼠绝望游泳时间最短，肝糖原含量最高、血尿氮含量最低，氧合血红蛋白含量最高，SOD活力最高；表明大豆肽B体内抗氧化活性最好，可以有效地减少能源物质消耗，并且减轻脑部疲劳。大豆肽A抗疲劳效果其次，与鹿血肽近似。但都显著高于大豆蛋白组和生理盐水组。在大豆肽脱苦方面，本文采用活性炭吸附与有机酸、葡萄糖掩盖结合的方法。经正交试验确定，酶解液经2％活性炭处理后，最佳添加比例为：柠檬酸0．3％，苹果酸0．1％，葡萄糖3％。此时水解液苦味基本

4、被掩盖，具有酸甜的口味并带有淡淡苹果香气。关键词：大豆肽抗疲劳抗氧化风味调节AbsuaerAbstractOxidativestressthatoccurredinexerciseisanessentialcauseoffatigue．Theantioxidantscanalleviatetheoxidativestressandlessenfatigue．，nksoybcanpeptideisakindofgoodexoticantioxidantwhichhasfeaturessuchassimple-craft,low-cost,a

5、ndfastabsorbed．Thisexperimentinvestigatedtheanti-fatigueandanti-oxidationeffectsofsoybeanpeptideinmice，andtherelationbetweenthem．Atfirst，wechosethecraftofsoyproteinenzymolysis．啊托effectsof4kindsofproteases(thealkalinityproteinase，theneutralproteinase，Neutrase，papain)ontheh

6、ydrolysisofsoyproteinwerecomparedbythedegreeofhydrolysisandtheabilityofeliminatingfreeradical．Thehydrolysateofalkalinityproteinaseandneutralproteinasehadthehighestabilityofeliminatingfreeradical．Double-enzymehydrolysiseswerecarriedonwiththistwokindsofproteases,andtheprodu

7、ctswerenamedsoybeanpeptideA&B．Infirsttest，40micewererandomlydividedintocontrolgroup，soypeptideA&Bgroup，soyproteingroupwhichweregivenrespectively谢也physiologicalsaline，soypeptideA&Bandsoyproteini．g．at0．89，d·kg．After2weeks，weight-loadedswimmingtestwasperformedtoobservethedea

8、thtimeandtheotherbiochemicalindicators，suchastheactivitiesofLDHandSOD，thecontentofhepaticglycoge