人组织激肽释放酶基因及其蛋白在胃癌组织中的表达的意义

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1、』，‘嬲嬲幽～一{上海交通大学医学院2007级博士研究生学位论文人组织激肽释放酶基因及其蛋白在胃癌组织中表达的意义CLINICALSIGNIFICANCEoFHUMANKAI．LIKREINGENEANDITSPRoTEINSEXPRESSIONINPATIENTSWITHGASTRICCANCER研究生姓名：沈志勇研究生学号：0077219140指导教师：曹晖教授学科、专业：外科学(普通外科)研究方向：胃肠外科、胃癌基础、I临床研究申请学位：外科学博士学位(医学专业学位)论文提交日期：2010年3月关键词：

2、人组织激肽释放酶基因，胃癌细胞株，小RNA干扰细胞生长，粘附及侵袭能力2上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日本学位论文同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交

3、通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。(请在以上方框内打“4”)学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日4上海交通大学学位论文答辩决议书研究生姓名沈志勇学号∞77219140导师姓名曹晖论文题目人组织激肽释放酶基因及其蛋白在胃癌组织中表达的意义学科(专业)外科学(黼㈣l嚣惑I仁徽妻k答辩委员会成员姓名工作单位职称，签名／，、秦新裕复旦大学附属中山医院教授琶承

4、∥樊嘉复旦大学附属中山医院教授挚几全志伟上海交通大学医学院附属新华医院教授绲。沈锋第二军医大学附属东方肝胆医院教授’嬲韩天权上海交通大学医学院附属瑞金医院教授觌?在I，’评语和决议：该研究通过检测人组织激肽释放酶基因(KLKs)成员KLKII、KLKl2基因及蛋白在胃癌肿瘤组织、癌旁组织、正常组织和外周血清中的表达和含量，并通过siRNA技术沉默KLKl2基因抑制胃癌细胞增殖和浸润转移能力，探讨KLKII、KLKl2基因及其蛋白表达水平与胃癌的发生、发展的临床意义。结果显示：胃癌患者外周血KLKl2的含量升高

5、，胃癌患者肿瘤组织中KLKl2mRNA及相应蛋白表达显著升高，siRNA基因干扰可抑制胃癌细胞株KLKl2mRNA及其蛋白的表达，抑制胃癌细胞株生长、粘附侵袭分子表达和粘附侵袭能力，对探索胃癌治疗新方法具有重要的指导意义。该课题选题能够结合临床实际，具有一定的创新性。研究设计科学、目的明确、研究方法正确可靠、实验结果真实可信，论文写作逻辑性较强、层次分明、文笔较流畅、结论可靠。该课题的研究结果对于胃癌的基础研究和临床工作有一定的指导意义。该生论文汇报流畅，答辩思路清晰，回答切题，从论文写作与答辩反映出该生具有

6、较扎实的基础理论知识和专业知识，有一定的科研工作能力。经答辩委员会讨论，一致通过论文答辩，建议授予博士学位。毒虹产，答辩委员会主席(签名)珈，·年V月／弓日上海交通大学医学院2007级博士学位论文人组织激肽释放酶基因及其蛋白在胃癌组织中表达的意义摘要目的：研究并检测人组织激肽释放酶基因(humankallikreins．m江Ks)家族成员KLKll、KLKl2基因及其蛋白在胃癌患者肿瘤组织、癌旁组织、正常组织和外周血清中的含量和表达水平，在此基础上通过siRNA技术沉默KLKl2基因从而抑制胃癌细胞增殖和浸润

7、转移能力，探讨KLKl1、KLKl2基因及其蛋白表达水平与胃癌的发生、发展、预后关系的临床意义，以期为胃癌的早期诊断、筛选、治疗及术后预后评估寻找～种实用、可靠的新方法。方法：(1)收集上海交通大学医学院附属仁济医院普外科2008年7月--2009年6月间50例接受胃癌根治术患者作为胃癌组，所有病例术前均未进行过放疗或化疗等新辅助治疗，且术后均经病理学检查得以证实。另收集同期50例接受非胃癌手术患者作为对照组。通过ELISA和免疫组化技术检测胃癌患者外周血清中及组织内KLKll、KLKl2的浓度和表达水平。(

8、2)收集50例行胃癌根治术患者术中的新鲜大体标本，分别切取胃癌肿瘤组织、肿瘤旁3cm处组织和肿瘤旁>5cm以上的正常胃壁组织，应用实时定量PCR(quantitativerealtimePCR，qRT-PCR)和Westernblot技术分别检测KLKl1和KLKl2mRNA及其蛋白的表达水平。(3)通过qRT-PCR上海交通大学医学院2007级博士学位论文和Westernblot技术检测不同病理分