应用病菌毒素筛选香蕉抗枯萎病突变体

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1、独创性声明本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位(毕业)论文作者亲笔签名；矛j；琦端日期：l007耳占司论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅：学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手

2、段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。田7学位(毕业)论文作者亲笔签名：雪-l；jli磷日期：工D01耳占日指剥獬繇彳二牡帆一殍／考-福建农林走擘硕士学位论文摘要以香蕉枯萎病菌(Fusariumoxysporumf．sp．cubense)粗毒素为选择压力，结合组织培养技术，利用多种方案筛选香蕉抗枯萎病菌突变体，并对突变体再生苗与亲本组培苗的抗病性和抗性生理生化基础进行比较。在香蕉(MusaAAA)组织培养过程，将枯萎病菌粗毒素添加到组织培养基中。结果表明，毒素对香蕉组培芽的分化和存活具有较强的抑制作用，粗毒素的添加剂量与组培芽枯死率成正相关，

3、致枯萎50％的粗毒素剂量为36．3038g．g·mL-‘。利用一步正筛选与多步正筛选分别获得了抗病突变体。根据筛选过程中分生芽的存活率及抗病性鉴定结果，确定在半致死毒素剂量水平上连续2次筛选后存活的分生芽转接到毒素剂量逐步提高的培养基中的多步筛选方案II为最佳筛选方案。抗病性鉴定结果表明，突变体再生苗的抗性水平比亲本组培苗显著提高，突变体再生苗对毒素的抗性程度明显高于对病菌的抗性，突变体再生苗抗毒素能力的高低与抗病菌致病作用能力的高低并非完全一致，上述结果表明了以毒素作为筛选压力进行香蕉抗枯萎病突变体筛选的有效性。对毒素筛选获得的突变体分生芽抗性分析结果表明，突变体分生芽虽然

4、经过连续5次继代在不含毒素的培养基中，但其对毒素的抗性并没有丧失，香蕉突变体分生芽的存活率均在80％以上，极显著高于对照。这说明采用多步筛选的方法诱导的香蕉分生芽，对毒素的抗性较强、具有稳定性。用毒索处理突变体及其亲本组培苗，测定处理后不同时段蕉苗组织中保护性酶活性的变化状况醴探明突变体抗性变化的生理基础。测定结果表明，突变体再生苗植株组织内的保护性酶活力显著增强．其中SOD、CAT、PALS活性的变化趋势基本一致，既先升高后降低，突变体植株的酶活性始终高于对照植株。MDA含量变化趋势与保护性酶活性变化相反，先下降后上升，且对照上升的幅度高于突变体。突变体分生芽的细胞膜透性低

5、于亲本的细胞膜透性表明，经过毒素筛选的分生芽，其细胞膜耐毒素的能力得到提高。POD同工酶电泳分析表明，突变体蕉苗没有新的酶带产生，但是有的条带比对照颜色加深，带幅变宽，说明突变体蕉苗的POD同工酶活性得到加强。关键词：香蕉枯萎病菌：毒素；筛选；抗病突变体；抗性生理福建衣林走学硕士擘位论之AbstractCo-cultivationtechniquewasdevelopedforinvitroselectionofbananamutants，whichcrudetoxinswereextractedfromFusariumoxysporumf．sp．cubensewereuse

6、da．sselectionfactor．Thecharactersofphysiologicalandbiochemicalofregeneratedmutantsandtheirparentsweredetermined．Toaimedatdetermininganappropriateconcentrationofthecrudetoxinformutantsscreen，thebananamultiplebudclumpswereculturedonthemodifiedMSmediumsupplementedwithcrudetoxins．Theresultsshow

7、edthatthesurvivabilityanddifferentiationofbananabudswereinhibitedbycrudetoxins．TherewasacorrelationbetweendoseofthecrudetoxinswhichaddedtotheMSmediumandthesurvivabilityofbananabuds．Whentheinhibitorytoxicitydoeswas36．338lag‘mL～．whichcaused50％ofbananabudsw