南岭地区观光木种群遗传多样性issr的分析

南岭地区观光木种群遗传多样性issr的分析

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1、IIIlUlIIIIIUl中南林业科技大Y23学16856●学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品,也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:辩焙加哆年∑月≥。日中南林业科技大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同

2、意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于:1、保密口,在年解密后适用本授权书。2、不保密口。(请您在以上相应方框打“√”)1作者签名:善泓导师签名:和弘1≥年p弓铂≯『;年I朔3奄日捅斐观光木(TsoongiodendronodorumChun)为木兰科植物,是古老的孑遗树种,对研究古代植物区系、古地理、古气候具有重要的科学价值。目前,观光木天然种群量小,

3、多数种群仅剩下几株甚至1株散生木,为偶见种,种群灭绝的风险很大,已被列为国家二级重点保护植物。因此,开展观光木遗传多样性研究及保护工作已迫在眉睫。本论文以分布最为集中的南岭地区观光木种群为对象,开展遗传多样性研究,主要研究结果如下:(1)采用正交设计优化影响观光木ISSR.PCR扩增的主要因子,建立了稳定的、重复性好的ISSR.PCR反应最佳体系(20此):模板DNA50ng、TaqDNA聚合酶1.25U、Mgcl22.5mmol/L、dNTPs0.25mmol/L、引物0.4肛mol/L。扩增反应程序:94℃预变性5min;94℃变性1mi

4、n,退火30s(退火温度依引物而定),72℃延伸90S,35个循环;72℃延伸7min;4℃保存。(2)利用ISSR.PCR优化扩增体系对南岭地区14个观光木天然种群255株个体进行遗传多样性分析,筛选出8条ISSR引物共扩增出182条清晰、重复性高的条带,其中145个为多态条带,多态条带百分比为79.67%,各种群尸值为9.34%~62.64%,平均为43.45%;各种群Shannon信息指数(D为0.0565~0.2873,平均为0.2054。这表明,观光木在物种水平和种群水平上都具有较高的遗传多样性。其中,广东南昆山种群遗传多样性最高(

5、P=62.64,I=0.2873),广东龙潭角种群遗传多样性最低(尸=9.34%,I=0.0565)。分子方差(AMOⅦ)分析显示,62.42%的遗传变异发生在种内,37.58%的遗传变异发生在种间,种群间遗传分化明显;聚类分析表明,采自贵州、湖南、广西的种群聚类在一起,大部分江西种群聚类在一起,广东车八岭和大埔丰溪种群与江西定南种群聚类在一起,种群遗传变异分布模式基本上与其地理生态格局一致。(3)观光木天然和人工迁地保护种群遗传多样性分析表明,观光木天然种群P值和Shannon信息指数(D的平均值(59.60%、0.2847)均高于人工迁地

6、保护种群(44.78%、0.2333),说明人工迁地保护种群遗传多样性降低。分子方差分析表明,天然和人工迁地保护两类种群间的变异占总变异3.52%(df=l,胗0.05),表明这两类种群类型遗传结构差异不显著。(4)基于本研究结果,我们认为,人为破坏活动可能是观光木濒危的主要原因之一,环境生态选择压是种群遗传分化的重要因子,已建立观光木迁地保护林不能成为其天然种群的有效基因库。建议在保护观光木天然种群的同时,应从多个种群中收集材料建立迁地保护林,并加强生殖生物学特性研究,最大程度保护该物种的遗传多样性并维持其生存繁殖能力。关键词:观光木;IS

7、SR;遗传多样性:天然种群;迁地保护;聚类分析ABSTRACTTsoongiodendronodorumChunbelongstomagnoliaceae.Ithasmanyimportantscientificvaluefortheflora、theancientgeographyandclimate.Nowadays,thenumberofnaturalpopulationofzodorumhasdeclined,andmostpopulationsonlyhaveoneorseveraltrees.Itisinperilofextinc

8、tionandhasbeenclassifiedasthestatesecondclassprotectedplantinChina.Therefore,study

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