pkm2对胃腺癌细胞增殖和凋亡作用的初步研究

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1、英文缩略词表ABBREVIATIONS缩写英文全称中文全称Ampampicillin氨苄青霉素APSAmmoniumpersulfate过硫酸铵bpbasepair碱基对BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白cDNAcomplementarydeoxyribonucleicacid互补DNACtcyclethreshold循环阈值ddH2ODoubledistillatedwater双蒸水DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DTTDithiothreitol二硫苏糖醇DMSODimethylsulfoxi

2、de二甲基亚砜EBethidiumbromide溴化乙啶ELISAEnzymeLinkedImmunosorbentAssay酶联免疫吸附实验FBSFetalbovineserum胎牛血清GAgastricadenocarcinoma胃腺癌gGravitationalacceleration重力加速度kDkilodalton千道尔顿kbkilobasepair千碱基对LBLuria-BertanimediumLB培养基MSTmediansurvivaltime中位生存时间MTT3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3

3、-(4，5二甲基噻唑-2)-23,5-di-phenytetrazoliumromide5-二苯基四氮唑溴盐ODOpticaldensity光密度PAGEPolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲生理盐水PCRpolymerasechainreaction聚合酶链反应QPCRreal-timefluorescentquantitativePCR实时荧光定量PCR1万方数据缩写英文全称中文全称RT-PCRreversetranscription

4、polymerase反转录聚合酶链反chainreaction应ssecond秒SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠TaqThermus-aquaticusDNApolymerase耐热DNA聚合酶TAETris-acidelectrophoresisbuffer乙酸盐酸缓冲液TrisTris(hydroxylmethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷Tmmeltingtemperature融解温度TMEDATetramethylethylenediamine四甲基乙二胺2万方数据PKM2对胃腺癌细胞增殖和凋

5、亡作用的初步研究摘要胃癌是世界范围内最为常见和死亡率较高的恶性肿瘤之一，特别是在我国的东南沿海地区。在查阅文献和本中心实验室原有工作的基础上，本研究应用免疫组织化学、真核载体转染、Westernblot、流式细胞术、ELISA、实时荧光定量PCR等技术，初步探讨了丙酮酸激酶M2型(肿瘤M2丙酮酸激酶，PKM2)对胃腺癌细胞增殖和凋亡的作用及初步机制，为临床胃腺癌治疗寻找可能的药物作用靶点奠定基础。第一部分应用免疫组化技术分别测定PKM2和IL-6在113例胃腺癌组织和同一患者的癌旁组织样本中的表达，分析胃腺癌组织中是否存在PKM2过表达及其与患

6、者临床病理特征、生存期的关系。结果表明：在113例胃腺癌组织样本中，PKM2过表达率为61.9%（70/113）；IL-6过表达率为61.1%（69/113）。1、PKM2在胃腺癌组织中表达明显高于配对的癌旁组织样本中的表达，两者差-5异具有统计学意义(P=9.96×10)。2、PKM2在胃腺癌中组织中的过表达和患者的性别、年齡、分化程度、腺癌的组织学类型、远处转移无统计学意义，但与肿瘤大小、肿瘤TMN分期、侵袭-4至浆膜外、淋巴结转移密切相关，特别与患者的存活显著相关（P=4.78×10)。3、患者的存活和性别、年齡、分化程度、腺癌的组织学类

7、型无关，但与肿瘤大小、肿瘤TMN分期、侵袭及浆膜外、淋巴结转移、远处转移、PKM2过表达密切相关。4、COX模型和K-M曲线生存分析：PKM2在胃腺癌和癌旁组织中的过表达差值是1+、2+、3+的患者死亡风险分别是未过表达患者的2.66倍（HR，2.66，95%CI，0.92to7.69；P=0.071）、10.01倍（HR，10.01，95%CI，0.92to7.69；-5-5P=2.55×10）、18.74倍（HR，18.74，95%CI，3.43to29.25；P=1.64×10），并且过表达程度越高，风险也就越高；PKM2过表达患者与未过

8、表达患者之间-5生存时间差异具有统计学意义（LogRankP=1.05×10），中位生存时间（MST）从67.0月锐减为35.0月。5、PKM2和IL