兔耳瘢痕模型建立和评价

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1、中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：．壶球日期：竺缝：丝：手中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即

2、：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：壶建指导教师签名：兰丝日期：兰注：之：生目录摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6论文1葑—言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7刖吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，研究资料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36，一二一二四五六·中文论著摘要·兔耳瘢痕模型的建立和评价目的皮肤瘢痕是一个动态和持续的过程，然而它在人体内的研究具有明显的伦理限制。体外(细胞培养)和体内(动物模型)可以帮助阐述肥厚性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机制，促进治疗措施的发现和

5、测试。尽管细胞培养可以用于新治疗方案作用机制的确证以及用于建立人体安全剂量参考范围，但是在新治疗用于人体前，通过可预测的动物模型来评估其安全性依然是很有必要的。值得注意的是，虽然大量的科学文献应用小鼠、新西兰兔，以及其他动物来研究肥厚性瘢痕，但是这些种属创口修复过程与人体相比还是存在很大差别的。一个理想的动物模型应在临床、组织表现，生化，免疫，分子生物，和临床行为方面与人体肥厚性瘢痕相符。有些手术瘢痕会在兔耳上持续数月不消退，基于此项观察，Morris等人在1997年成功地建立了兔耳的瘢痕模型，并用“新生瘢痕面积，肥厚

6、指数”等指标对瘢痕进行了评价，还在瘢痕生成第16天时用糖皮质激素对瘢痕进行处理，发现与对照组相比，差异显著。此后，兔耳模型被国内外多次采用，研究分子机制或评价药物治疗效果。但兔耳模型还未在本实验室中建立过，因此本实验主要效仿Morris的模型，建立兔耳的瘢痕模型，并从增生指数，弹力纤维，胶原纤维，I、III型胶原的表达等几方面对兔耳瘢痕模型进行评价。乃法公兔和母兔在瘢痕修复过程中没有差异。本实验全部选用母兔来保证实验的同一性。所有的切口均在耳部腹侧创建，且为全层，这样可以避免毛发周期对于伤口愈合和瘢痕形成的影响。三只新

7、西兰母兔子，月龄：2．0_0．5个月，体重：1．5—2．5千克，在标准条件下饲养。第0天时，按30mg／kg的剂量用3％戊巴比妥钠对兔子迸行耳缘静脉麻醉，并在兔耳的腹侧用直径5mm的活检穿孔器打孔，在解剖显微镜的观察下，剥除兔耳腹侧的真表皮以及软骨膜，按压止血，消毒，包扎。分别在第19天，21天，22天，和25天时，对兔耳腹侧生长的瘢痕组织进行取材，同时取正常皮作为对照。标本脱钙处理后制作成蜡块。常规HE染色观察瘢痕增生指数，免疫组化检测瘢痕中弹力纤维的表达，Verhoeff铁苏木素染色观察组织中弹力、胶原纤维的共表达

8、，Masson三色染色法观察胶原的表达，Herovici染色法观察瘢痕组织中I、III型胶原的表达。同时，取经病理诊断的人的瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的组织样本，分别进行Verhoeff铁苏木素，Masson三色，以及Herovici的染色，并将兔耳瘢痕的染色结果与人的瘢痕疙瘩及增生性瘢痕的染色结果进行比较，从而对兔耳的瘢痕模型进行评价