马褂木遗传多样性研究

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1、分类号苎2窆2：21UDC硕士学位论文马褂木遗传多样性研究石晓蒙论文答辩日期2Q!三生墨旦2窆旦学位授予日期型至：芝占广西大学学位论文原创性和使用授权声明f愀燃本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国

2、家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。日不保密。(请在以上相应方框内打“√")论文作者签名：指导教师签名：作者联系电话：压啄饬物i朝娜。口{6臼日期：知J多．口，·，乒日期纠专．。6。／≯电子邮箱：fI7p如害i7豌多芗·阳马褂木遗传多样性研究摘要本文对采自广西分布区内全州县安和乡、乐业县雅长乡、资源县两水乡、环江县明伦镇、融水县安太乡和老堡乡共6个自然种群样本和广西咸水林场和高峰林场的种源试验林中保

3、存的9个种源(湖南步城、安徽休宁、江西庐山、湖北利川、福建武夷山、广西全州、贵州黎平、云南金平、浙江安吉)的样本通过ISSR分子标记技术进行遗传多样性研究，得到以下结论：(1)比较两种马褂木DNA提取方法，CTAB法与植物基因组试剂盒提取法，用植物试剂盒提取的DNA从质量、纯度、琼脂糖凝胶凝胶电泳结果、稳定性等方面都优于CTAB法。(2)确定最终马褂木ISSR-PCR扩增体系，最终ISSR．PCR扩增体系：总体积20止中含有10xbuffer为2．0rtL、MgCl2浓度为1．8mmol／L、dNTPs终浓度为O．2mmol／L、引物终浓度为O．5I．tmol／L、TaqDNA聚合酶

4、1U、DNA模板60ng。最终的PCR扩增程序：94℃预变性5min，94℃变性lmin，N℃退火45S，72℃延伸2min，45个循环，72℃完全延伸7min，4℃保存。(3)引物筛选：可以扩增出较为清晰的引物为UBC．807、UBC．809、UBC一816、UBC一817、UBC一818、UBC．825、UBC．826、UBC．829、UBC．839、UBC．847、UBC．849、UBC．850、UBC．851、UBC．854、I虺C．878、I7BC．880、UBC-881、UBC-887、UBC-889、UBC．890、UBC．891、本实验的PCR扩增从上述引物中选出10

5、条最清晰的多态性高的引物分别为UBC．807、UBC-818、UBC．825，UBC．826、UBC．829、UBC．847、UBC．8817UBC．8897UBC．890、UBC．891。(4)全州县安和乡、乐业县雅长乡、资源县两水乡、环江县明伦镇、融水县安太乡和老堡乡共6个自然种群的遗传多样性分析结果：共扩增出125个清晰的位点，其中有多态性的为122个，多态性百分率为97．60％；其中融水安太乡的遗传多样性水平最高；6个自然群体间总的遗传变异中有29．10％来自种群间，而种内遗传变异70．90％，根据UPGMA聚类分析，马褂木自然群体主要分为两类，一类是环江和融水安太乡、雅长，

6、另一类是全州和融水老堡乡、资源。(5)种源试验林中保存的湖南步城、安徽休宁、江西庐山、湖北利川、福建武夷山、广西全州、贵州黎平、云南金平、浙江安吉9个种源样本的遗传多样性分析结果：共扩增出126个清晰的位点，其中有多态性的为123个，多态性百分率为97．62％；其中湖北利川的遗传多样性水平最高；9个种源群体间总的遗传变异中有25．37％来自种群间，而种内遗传变异74．63％，根据UPGMA聚类分析，北部地区与南部地区可分为两大类，南部地区又可大致细分为西部地区，中部地区和中东部地区。(6)根据广西分布区自然群体和种源试验保存的种源样本的多样性分析，提出了中国马褂木种质资源保存的策略和

7、措施。关键词：马褂木ISSR分子标记聚类分析遗传变异STUDYONGENETICDIVERSITYOFT●·1r，’LZ厂iodend尸D以e力Z船enseABSTRACTThispaperstudiedongeneticdiversityofLiriodendronchinensebyISSRmakers，sampledfrom6naturalpopulations(Anhe，Quanzhou；Yachang，Leye；Liangshui，Ziyuan；