喹诺酮qns定量检测试剂盒elisa

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1、喹诺酮（QNS）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书一、概要喹诺酮（QNS）是近20年来迅速发展起来的一类十分重要的广谱抗生素，能抑制细菌DNA螺旋酶，抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强。已成为兽医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，被大量用于治疗、预防和促生长，由于其耐药性和潜在的致癌性引起广泛的关注。酶联免疫快速检测试剂盒具有成本低廉、操作简便、一次处理样本量大等优点，已成为常规的初步筛查方法。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点，

2、能最大限度地减少操作误差和工作强度。二、用途定量检测动物组织（肌肉、虾、鱼等）、血清和蜂蜜等样本中喹诺酮（QNS）的残留。三、检测原理本试剂盒采用竞争酶联免疫试验。检测的基础是抗原抗体反应，微孔板预包被羊抗鼠IgG捕获抗体，加入鼠抗喹诺酮抗体后，会与捕获抗体连接。经过孵育及洗板后，加入标准品、样品及喹诺酮酶标记物（QNS-HRP），游离的喹诺酮（QNS）与喹诺酮酶标记物（QNS-HRP）竞争喹诺酮抗体结合位点。经过孵育及洗板后，加入底物并孵育。结合的酶连接物将底物转化为蓝色的产物。加入反应终止液后使颜色由蓝转变为黄色

3、。在450nm处测量，吸光度值与样品中的喹诺酮浓度成反比，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中喹诺酮的含量。四、检测限检测限：0.1ng/ml（0.1ppb）五、特异性恩诺沙星………………………………………………100%环丙沙星………………………………………………96.6%氧氟沙星………………………………………………112.3%达氟沙星………………………………………………98%诺氟沙星………………………………………………134%5噁喹酸………………………………………………105.3%氟甲喹…………………

4、………………………………96.1%麻保沙星………………………………………………92.3%氨氟沙星………………………………………………110%洛美沙星……………………………………………87.7%培氟沙星……………………………………………129.6%依诺沙星……………………………………………100.7%六、试剂盒组成每一个盒中的试剂足够进行96个试验（包括标准测定），试剂盒中的组份如下：1、96孔酶标板1块（12孔×8条）：预包被羊抗鼠IgG2、标准液×6瓶（1ml/瓶）：0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL

5、、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL3、酶标记物（6mL）：辣根过氧化物酶标记的喹诺酮工作液4、喹诺酮抗体（10mL）：鼠抗喹诺酮单克隆抗体工作液5、底物液A（6mL）：过氧化脲6、底物液B（6mL）：四甲基联苯胺（TMB）7、终止液（6mL）：2NH2SO48、浓缩洗涤液（20×）（25mL）：含Tween-20的磷酸盐缓冲液（PBST）9、其他：封板膜3张，自封袋1个，说明书1份七、样本处理1、溶液配制配液1：8%甲醇-水溶液量取8ml甲醇加入到92ml去离子水中混匀。配液2：0.05M磷酸盐缓

6、冲液（PH＝7.2）称取12.9g十二水合磷酸氢二钠和2.18g二水合磷酸二氢钠，加去离离子水溶解定容至1L。配液3：洗涤工作液用去离子水将20×浓缩洗涤液按1：19体积比进行稀释（1份20×浓缩洗涤液+19份去离子水）用于酶标板的洗涤，洗涤工作液在4℃环境可保存一个月。配液4：复溶工作液用去离子水将2×浓缩复溶液按1：1体积比进行稀释5（1份2×浓缩复溶液+1份去离子水）用于样本的复溶，复溶工作液在4℃环境可保存一个月。2、样本处理前须知处理任何样本时，都必须注意：（a）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时

7、要更换吸头。（b）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必须使用洁净实验器具，以避免污染干扰实验结果。（c）未处理的样本冷冻保存。3、蜂蜜前处理方法方法一：┅┅取1.0±0.05g蜂蜜至50ml聚苯乙烯离心管中，加入5ml8%甲醇-水溶液（见配液1），用涡旋仪涡动5min，使其充分溶解；┅┅静止10min；┅┅取100ml加入300ml复溶工作液，用涡旋仪涡动混匀；┅┅取50ml用于分析。注：称取蜂蜜样本之前请于60℃水浴30-60min，振荡样本充分混匀后再取样。方法二：----取1.0±0.05g蜂蜜样本至50ml

8、聚苯乙烯离心管中，加入2ml0.05M磷酸盐缓冲液（见配液2），用振荡器振荡至蜂蜜全部溶解；----加入8ml二氯甲烷，用振荡器振荡5min,3000g以上离心5min；----轻吸掉上层，取下层有机相4ml至10ml干净的玻璃试管中，于50～60℃氮气流下吹干；----用1ml复溶工作液溶解干燥的残留物；-----取50ml用于分析。八、检测