246例慢性阻塞性肺病急性加重患者痰中嗜血杆菌分离及分析

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1、246例慢性阻塞性肺病急性加重患者痰中嗜血杆菌分离及分高占军1罗贤龙2正宁县人民医院检验科甘肃正宁745300；2.宁县县医院检验科甘肃宁县745302摘要：目的了解慢性阻塞性肺病急性加重期患者呼吸道标本中嗜血杆菌的分离率及其耐药性，为临床诊断及合理选用抗生素提供依据。方法对我院20□年8月・2014年6月246例以慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)收住入院的老年患者痰标本进行嗜血杆菌分离培养及药敏试验。采用嗜血杆菌专用巧克力培养基，5-10%CO2环境分离培养嗜血杆菌属细菌，V、X因子纸片

2、法卫星试验初步鉴定，API-NH鉴定条进行菌株鉴定；采用K・B法进行药皱试验，结果按临床和实验室标准协会(CLIS)文件抗菌药物敏感性试验执行标准进行判读；头泡硝卩塞吩纸片法测定β-内酰胺酶。结果246例慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)患者痰标本屮共分离出嗜血杆菌属细菌113株，阳性率45.9%,其屮流感嗜血杆菌15株，副流感嗜血杆菌87株，副溶血嗜血杆菌11株，阳性率分别为：6.1%、35.4%、4.5%。嗜血杆菌对氨节西林、复方新诺明、氨节西林/舒巴坦耐药率高，分别为69.9

3、%、93.8%、56.6%,对头抱咲辛，左氧氟沙星，环丙沙星，氯霉素，阿奇霉素、利福平、四环素、阿莫西林丨克拉维酸钾的耐药率分别为22.1%、8.0%、17.7%、12.4%、8.7%、13.3%、30.1%、30.1%。结论嗜血杆菌是慢性阻塞性肺病急性加重的重要致病菌，其屮副流感嗜血杆菌的分离率最高，临床需高度重视，治疗时应依据药敏实验结果合理选择抗菌药物，经验治疗时应避免选择氨茉西林/舒巴坦、氨茉西林、复方新诺明等耐药率高的药物。关键词：慢性阻塞性肺病；急性加重；嗜血杆菌；耐药性慢性阻塞性肺

4、疾病(ChronicObstructivePulmonaryDisease,COPD)是一种不可逆或不完全可逆并呈进行性进展的气流受限为特征的疾病，多存在于慢性支气管炎或肺气肿患者⑻。细菌感染在COPD的病因、发病机理、疾病进展过程中的重要作用已经得到证实⑹。嗜血杆菌属(HP)是专性寄生于人类上呼吸道的一类革兰氏阴性苛养性细菌，主要通过呼吸道感染引起原发和继发性感染，是呼吸道重要的机会致病菌，与人类疾病有关的主要有流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌⑴2］。目前的观点已经确认HP感染在COPD中起到重要

5、的致病性作用，其引起感染与慢性阻塞性肺病急性加重期进展相关［8］。本文对我院246例COPD急性加重(AECOPD)患者痰液标本进行HP培养鉴定与耐药性分析，现将结果报告如下。1.材料与方法1.1标本及其来源：246份痰液标本均采集自我院2011年8月-2014年6月期间以慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)收住入院的患者，年龄52・86岁，平均年龄69岁，其中男性137例(平均年龄75.3),女性109例(平均年龄71.5)。1.2培养基与试剂5%羊血琼脂平板、嗜血杆菌专用万古霉素巧克力琼脂

6、平板、喑血杆菌药敏试验用琼脂培养基(HTM)、标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、流感嗜血杆菌ATCC49247购自杭州天和微生物公司，MH琼脂粉、复方新诺明、四环素、氨茉西林、阿厅霉素、头孑包咲辛、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、氯霉素、氨茉西林/舒巴坦、阿莫西林/棒酸药敏纸片以及V因子、X因子、V+X因子、头孑包硝塞吩纸片均购自英国OXOID公司。API-NH鉴定条购自生物梅里埃公司。1.3方法1.3.1痰液标本采集与质量控制：病人在使用抗菌素治疗前，清晨用清水漱口后用力咳痰于无菌痰杯中

7、即时送检。痰标本直接涂片革兰染色镜检，每低倍视野上皮细胞<10个，白细胞>25个为合格标本。1.3.2细菌分离及鉴定：细菌分离鉴定均按操作规程⑴要求，痰液即吋接种到血平板和万古巧克力琼脂平板，置5%CO2环境、35°C培养18—24小吋，挑取血平板不生长，万古巧克力生长，光滑、湿润、透明或半透明圆凸菌落或扁平干燥、灰白色菌落，革兰染色呈革兰氏阴性细小多形性杆菌，用卫星试验、API-NH条鉴定到种。1.3.3药敏试验：采用纸片琼脂扩散(K・B)法，选择口种常用抗菌药物和HTM培养基。具

8、体操作和结果判断参照当年美国临床实验室标准化委员会(CLIS)标准。1.3.4β—内酰胺酶测定：将分离到的嗜血杆菌用头抱硝塞吩纸片进行β-内酰胺酶测定，10分钟内变红色为阳性。2•结果2.1嗜血杆菌的分离情况：246例痰液标本共分离出嗜血杆菌属细菌113株，总检出率45.9%,其中流感嗜血杆菌15株(6.1%),副流感嗜血杆菌87株(35.4%),副溶血嗜血杆菌(4.5%)株。2.2药敏试验结果：113株嗜血杆菌K-B法药敏试验结果如表1：表1.113株嗜血杆菌对11种抗菌药