拟南芥体细胞胚胎发生的机理研究

《拟南芥体细胞胚胎发生的机理研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中英文缩略表英文缩写英文全称中文解释LBmiRNAM．MLV．RTNPAODPCRpHRifRNARNaseART．PCRSAMSDSSSCssDNASTETE啊sLuria-BertanimediumLB培养基microRNAMoloneymurineleukemiavirusreversetranscriptase‘N-1-naphthyphthalamicacidopticaldensityPolymerasechainreactionPondushydrogeniiRifampicin。IUbonucleicacidR

2、ibonucleaseAReversetranscriptionPCRShootapicalmeristem小分子RNA鼠白血病病毒逆转录酶N-1．萘基邻氨甲酰苯甲酸光密度聚合酶链式反应氢氧离子浓度指数利福平核糖核酸核耱核酸酶A反转录PCR茎端分生组织十二烷基硫酸钠标准柠檬酸盐溶液鲑精DNASodiumchloride，Tris·CI，氯化钠、Tris·CI、EDTAEDTAbufferTris·C1，EDTAbuffer．Tris．(31·EDTA缓_冲液Trishydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基

3、甲烷Tween-20Polyoxyethene·-20··sorbitumX-galYEP5-BromoM-chloro一3-indoxyl-D—galactopyranosideYeastextractandpeptonemedium聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯5一溴．4．氯-3，吲哚一p-D一半乳糖苷YEP培养基关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全

4、了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：蕴肆导师签名．．燃19期：剐．／‘山东农业大学博士学位论文拟南芥体细胞胚胎发生的机理研究专业：发育生物学指导教师：张宪省教授博士研究生：苏英华摘要植物的各种器官、组织以及悬浮培养的细胞和原生质体均可诱导形成类似合子胚的结构

5、，但它们与合子胚起源不同，称为胚状体(Embryoid)。由体细胞发生的胚状体称为体细胞胚(SomaticEmbryo，SE)。体细胞胚胎发生是植物发育过程中的特殊现象，并在一定程度上重现了合子胚形态发生的特性，是植物细胞潜能完全表达的一种方式。因此，研究体细胞胚胎发生与发育的机理对于揭示细胞全能性与研究合子胚的分化和发育具有重要意义。本论文着重研究了拟南芥体细胞胚胎发生和发育的分子基础，研究结果为理解体细胞胚胎发生的分子机理提供了重要信息。主要研究结果如下：1．体细胞胚胎发生体细胞胚的产生首先需要胚性愈伤组织的形成，这个过程

6、是在外源生长素的作用下完成的。除去外源生长素，在愈伤组织表面诱导形成突起状的体细胞原胚，然后体细胞原胚两侧产生子叶原基，最终形成具有两片子叶、胚轴和胚根的成熟体细胞胚。2．胚特征基因的表达通过胚特征基因LECl，LEC2，FUS3，PEll和ABl3的表达模式分析，发现它们的表达去除激素的体细胞胚诱导阶段表达明显上调。利用G矾；报告基因Xe丁LEC2基因的表达进行了分析，结果显示它在体细胞原胚形成的早期开始表达，以后集中在子叶原基和子叶中表达。说明在体细胞胚再生过程中，胚特征基因的表达受到调节。3．reus和CLV3基因的表达

7、为了研究体细胞胚胎发生和发育过程中干细胞的起始，我们对删口CZ乃的表达模式进行了分析。研究结果显示，体细胞胚发生早期，在胚性愈伤组织表面4--一6层细胞(组织中心)中首先检测到彤U法因的表达。然后在新形成的体细胞原胚表面1"--3层细胞中出现干细胞特征基因CLV3的表达，并在此位置形成体细胞原胚的突起状结构。体细胞拟南芥体细胞胚胎发生的机理研究胚发育过程中，两基因的表达均逐渐集中在子叶之间的苗端分生组织中。诱导反义WUS基因表达，体细胞胚的产生受到抑制，胚发育基因的表达也受到影响。表明在体细胞胚发生过程中，组织中心的细胞先于干

8、细胞形成，朋，赃此过程中起关键作用。4．生长素极性运输及分布体细胞胚胎发生需要生长素诱导。生长素在体细胞胚胎发生过程中呈极性分布。如果在诱导过程中添加生长素极性运输抑制剂NPA，不仅破坏了生长素的极性分布，还影响了WUS的表达，最终不能产生体细胞胚。生长素外运蛋白PINl在体