β-氨基丁酸诱导马铃薯晚疫病抗性机理的初步研究

β-氨基丁酸诱导马铃薯晚疫病抗性机理的初步研究

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时间:2019-02-16

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1、华中农业大学硕士学位论文β--氨基丁酸诱导马铃薯晚疫病抗性机理的初步研究姓名:王静申请学位级别:硕士专业:蔬菜学指导教师:田振东201206B·氨基丁酸诱导马铃薯晚疫病抗性机理的初步研究摘要B.氨基丁酸(BABA)是一种非蛋白质氨基酸,它可以诱导许多种植物获得对多种病原菌的系统抗性。但其在不同的植物。病原系统中行使着不同的诱抗机制。本研究旨在通过观测BABA诱导后晚疫病原菌侵染动态,检测植株发生的防卫反应和参与的信号调控途径来探索BABA诱导马铃薯晚疫病抗性的机理,同时拟验证BABA早期诱导上调表达基因WRKY5的抗病功能。

2、主要研究结果如下:1.用BABA喷施马铃薯叶片,分别接种病原小种Lixl8和88069,然后运用荧光显微技术观察病原菌的侵染结构。结果表明,BABA处理植株后,病原菌的孢子萌芽率有所下降,在病原菌侵染早期(0~24hpi)更为明显;附着胞的形成和对照比也有下降趋势。表明BABA诱导以后,马铃薯在病原菌侵染早期已产生了阻碍作用。2.在组织化学层面检测了BABA诱导马铃薯发生的防卫反应,结果显示BABA处理的叶片,接种后6h在表皮细胞出现了H202积累,接种后24h在侵染点及附近细胞出现较多的胼胝质,并且有HR现象。对照叶片接种

3、后12h才出现H202积累,接种后24h仅在侵染点有少量胼胝质沉积,但没有HR发生。可见,BABA诱导处理的马铃薯植株在受到晚疫病原菌侵染时,可以更早更强的触发H202积累、胼胝质沉积和HR等防卫反应的发生。3.对获得的&COll干涉株系及NahG转基因株系进行了BABA诱导处理和病原菌接种。结果显示BABA在&COll干涉株系和对照植株上表现出相似的诱抗作用,但是在NahG株系上没有明显的诱抗作用。表明BABA诱导马铃薯晚疫病抗性需要SA信号途径,而不需要JA信号途径。4.构建了BABA早期诱导表达基因&脓K巧的超量表达载

4、体,转化鄂马铃薯3号(E3),获得了7个超量表达株系。实时定量PCR基因表达分析显示超量表达株系中&臃K"基因表达量都显著高于对照。选择3个超量表达效果好的株系进行了晚疫病原菌接种,结果显示&WRKY5转基因植株的病斑面积小于对照的病斑面积,表明&形RK巧转录因子可能参与了马铃薯晚疫病抗性的正调控过程。关键词:马铃薯,晚疫病,p一氨基丁酸,诱导抗性,茉莉酸,水杨酸,&凇K巧华中农业大学2012届硕士研究生学位论文Abs订actIB-aminobutyricacid03≯d3A)isanon-proteinaminoacidw

5、hichcallinducesystemicresistanceagainstawiderangeofpathogensinnumerousplantspecies.ButtheresistancemechanismsinducedbyBABAweredifferentialinvariousplantpathosystems.InordertofurtherlookintothemechanismsofBABAinducedresistanceagainstPhytophthorainfestansinpotato,weo

6、bservedinfectionprocessontheleavespre-treated谢mBABA,andexaminedthedefensereactionsandsignalingpathwaysinthisstudy.Atthesametime,wehopetoidentifythefunctionofresistanceharboredbyStWRKY5,agenewithaugmentedexpressioninducedbyBABAinearlyperiod.Themainresultsareasfollow

7、s:1.Afterpotatoleaveswerepretreated谢t11BABA,theleaveswereinoculated、)l,ith尸infestansisolatesLjxl8and88069.Pathogenstructureswereobservedbyafluorescencemicrotechnic.ThegerminationrateinBABApretreatedplantsdecreased,especiallyattheearlytime(0-24hpi).Besides,inBABApre

8、treatedpotatoleaves,thereWasadowntrendinthefrequencyofappressoriumformationcomparedtothatoftheuntreatedplants.TheseindicatedthatBABApretreatrnent

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