不同消化性疾病来源的幽门螺杆菌毒力基因caga、vaca、oipa、dupa的检测及其意义

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1、分类号：R378学校代码：10392学科专业代码：100103学号：200901434福建医科大学硕士研究生毕业论文不同消化性疾病来源的幽门螺杆菌毒力基因cagA、vacA、oipA、dupA的检测及其意义ThedetectionandsignificanceofHelicobacterpylorivirolencegenescagA、vacA、oipAanddupAfromdifferentsourceofdigestivediseases学位类型：医学硕士所在学院：基础医学院研究生：徐凯学科、专业：病

2、原生物学导师：佘菲菲教授研究起止日期：2009年9月至2012年3月答辩日期：2012年5月31日二零一二年六月1万方数据2万方数据目录中文摘要---------------------------------------------------------4英文摘要---------------------------------------------------------7正文前言-----------------------------------------------------10材料和方

3、法-----------------------------------------------12结果-----------------------------------------------------16讨论-----------------------------------------------------27结论-----------------------------------------------------32参考文献------------------------------

4、-------------------33综述------------------------------------------------------------37参考文献-------------------------------------------------42致谢------------------------------------------------------------463万方数据中文摘要[背景和目的]幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，以下简称Hp）是引起

5、胃炎、消化性溃疡、胃粘膜淋巴组织相关性淋巴瘤和胃癌的重要病原体。全球约有一半以上人口感染Hp，但在感染人群中只有约20%发生消化性疾病，且疾病的严重程度不同，其原因尚未阐明，可能与细菌基因高度多态性、宿主和环境等因素有关。HpcagA、vacA、oipA、dupA四种毒力基因是幽门螺杆菌致病的重要因素。幽门螺杆菌感染的特点，主要体现在菌株基因多态性和地区分布差异性，且各种基因与疾病之间的关系也有地区差异性。本研究旨在调查胃癌高发的福州地区的HpcagA及其C端的EPIYA基序、vacA和dupA分型以及o

6、ipA基因开关状态，了解本地区的幽门螺杆菌基因多态性，并探讨本地区消化性疾病与这些基因、性别和年龄之间的关系，以便对幽门螺杆菌的致病机制有更加深入的认识。[材料和方法]1．幽门螺杆菌的分离与鉴定：从福建省肿瘤医院，福建医科大学附属协和医院和福建省立医院采集的胃组织标本（来自慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者），分离培养Hp，组织研磨后接种于布氏平板，于厌氧培养箱培养3-5d，经尿素酶、过氧化氢酶及形态学鉴定确认。2．用高纯度基因组DNA模板提取试剂盒（购自罗氏公司）提取Hp基因组DNA，并以其为模板，PCR扩

7、增cagA3′端序列、vacA基因s区、i区、m区、oipA信号区、dupA（jhp917和jhp918）基因。3．cagA3′端和oipA信号区PCR后送生工生物（上海）有限公司，sanger法，ABI-PRISM3730测序仪进行基因测序，Bioedit分析软件分析EPIYA基序类型和oipA基因开关状态。4．统计分析：运用方差分析比较各疾病组之间年龄的差异，卡方检验分析疾病与各基因之间的关系，logistic回归分析各疾病组之间的基因差异。[结果]1.分离培养获得82株幽门螺杆菌，其中分离自慢性胃炎

8、患者37株，消化性溃疡患者25株（其中胃溃疡12株，十二指肠溃疡13株），胃癌患者20株。疾病与性别和年龄的关系：单因素卡方分析胃炎，消化性溃疡和胃癌组间性别差4万方数据2异，χ=7.39，P<0.05，P=0.022，差异有统计学意义，表明消化性溃疡和胃癌患者中男性比例高于胃炎患者中男性的比例；方差分析三组疾病间年龄差异，F=1.51，P>0.05，P=0.227，差异无统计学意义。2.基因检测及统计学分析结果：所有被测菌c