丹参不同组分对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织pparαmrna表达的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文丹参不同组分对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织PPARαmRNA表达的影响姓名：路帅申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：张一昕201203中文摘要丹参不同组分对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织PPARamRNA表达的影响摘要目的：丹参是中医临床常用的活血化瘀药，具有活血通经、凉血消痈、除烦安神等功效，其活性成分主要包括水溶性和脂溶性两大类，水溶性有效成分为酚酸类，脂溶性有效成分为丹参酮类。大量临床资料表明，瘀血内阻为非酒精性脂肪肝(NAFLD)的重要发病机制，丹参为中医临床治疗脂肪肝过程中比较常用的活血化瘀药。为了进一步探讨其不同组分防治NAFLD的作用机制，参照相关文献运

2、用喂饲高脂饲料法复制NAFLD大鼠模型，同时施加药物干预，观察了丹参总酚酸和丹参总酮对NAFLD大鼠脂质代谢、肝功能以及肝组织PPARotmRNA表达的影响，探讨了其促进脂质代谢、抗脂质过氧化损伤、保护肝功能和增强PPARamRNA表达的作用机制，歹i：运Jlj光镜观察了其对肝组织形态学的影响。方法：选用SD大鼠50只，体重180"-'2009，雄性。大鼠自由饮水进食，饲养于18。C"22℃明暗各12小时的清洁级动物实验室内。正常喂养l周后，按体重分层随机分为5组，每组10只，即：正常对照组(简称正常组，normalcontrolgroup，N)、模型对照组(简称模型组，modelgr

3、oup，M)、丹参总酮组(简称总酮组，Zong．tonggroup，T)、丹参总酚酸组(简称总酚酸组，Zong—fen—suangroup，F)、阳性药(东宝肝泰)对照组(简称对照组Dong．Bao．Gan．Taicontrolgroup，D)。除正常组喂饲普通饲料外，其余各组均喂饲高脂饲料，共造模8周。造模的同时，各用药组灌服治疗药或对照药，正常组与模型组灌服等量生理盐水，每天上午灌胃1次。各组1次／d灌胃，每次用药体积均按lml／1009计算。于最后1次给药后禁食12h，麻醉状态下股动脉取血，将血样低温离心，分离血清，密封，．20℃冷贮备用。于肝脏最大叶距边缘O．5cm处取少许肝组

4、织，用液氮冷冻以备RT-PCR检测PPARamRAN，并取相同部位0．5×0．5×O．5cm3大小的肝组织，置于4％多聚甲醛液中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，以备光镜观察。然后取适量肝组织冷冻以备制作肝组织匀浆，检测TC、TG、FFA、SOD、MDA的含量或活性。中文摘要结果：：i．1各组大鼠血清TG、TC含量的变化与正常组比较，模型组大鼠血清TG、TC明显升高(p

5、血清AST、ALT活性的变化与正常组比较，模型组大鼠血清AST、』岍活性明显增高(p

6、总酚酸组FFA的含量均低于对照组(p

7、周围呈放射状分布，细胞呈多边形。模型组大鼠肝细胞呈现中至重度脂肪变性，伴细胞水肿，少量的肝细胞坏死，但未见明显的纤维化改变。各治疗组大鼠的肝细胞脂肪变均呈现不同程度的改善趋势，以总酚酸组改善程度最为明显。6各组大鼠肝脏PPAR0【mRNA表达的变化RT-PCR后，琼脂糖凝胶电泳，在444bp、587bp处分别显示出PPARot中文摘要和p．aetinog泳带，与预期结果～致。模型组大鼠肝组织PPARamRNA的表达明显低于正常组(P