反复熔铸对非镍基烤瓷合金细胞毒性的影响及其机制的研究

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1、分类号：R783.6学校代码：10392学科专业代码：100302学号：200901274福建医科大学硕士研究生毕业论文反复熔铸对非镍基烤瓷合金细胞毒性的影响及其机制的研究EffectofRecastingonCytotoxicityandMechanismsoftheNon-Nickel-BasedCeramicAlloys学位类型：医学硕士所在学院：口腔医学院研究生：林泓磊学科、专业：口腔临床医学导师：程辉教授研究起止日期：2010年10月至2012年2月答辩日期：2012年5月27日二○一二年六月-0-万方数据-1-万方

2、数据目录英文缩略词表…………………………………………………………………………31中文摘要………………………………………………………………………………41英文摘要………………………………………………………………………………61前言……………………………………………………………………………………81正文1第一部分：反复熔铸对非镍基烤瓷合金离子析出的影响…………………………111第二部分：反复熔铸对非镍基烤瓷合金体外细胞毒性的影响……………………281第三部分：反复熔铸非镍基烤瓷合金对L-929细胞细胞周期的影响……………461第四

3、部分：反复熔铸非镍基烤瓷合金对L-929细胞细胞凋亡的影响……………611全文总结……………………………………………………………………………751参考文献……………………………………………………………………………771致谢…………………………………………………………………………………841综述：细胞毒性试验在口腔合金材料生物相容性评价中的应用………………851-2-万方数据英文缩略词表缩写英文全称中文全称DMEMDulbecco’sModifiedEagleMedium细胞培养液DMSODimethyeSulfoxide二甲基

4、亚砜EDTAEthyleneDiamineTetraaceticAcid乙二胺四乙酸FBSFetalBovineSerum胎牛血清FCMFlowCytometry流式细胞仪FITCFluoresceinIsothiocyanate异硫氰酸荧光素ICP-AESIndictiveCoupledPlasma-Atomic电感耦合等离子体发射EmissionSpectroscopy光谱仪MTTMethyl-thiazolyl-tetrazolium四甲基偶氮唑蓝NBSNewBovineSerum新生牛血清ODOpticalDensit

5、光密度值PBSPhosphate-bufferedSaline磷酸盐缓冲液PIPropidiumIodide碘化丙啶PSPhosphatidylserine磷脂酰丝氨酸RGRRelativeGrowthRate细胞相对增殖率3万方数据反复熔铸对非镍基烤瓷合金细胞毒性的影响及其机制的研究【摘要】目的：研究反复熔铸对钴铬、纯钛、钯基和金铂等4种非镍基烤瓷合金离子析出、体外细胞毒性、细胞周期及细胞凋亡等生物相容性相关指标的影响。方法：（1）将从厂家购买的上述4种烤瓷合金分别经过1~3次熔铸，即获得分别经1~3次熔铸后的4种烤瓷合金的

6、片状测试试件。每次熔铸后的烤瓷合金在再次熔铸前均需经过“非镍基烤瓷合金再次熔铸前处理工艺”进行严格处理，形成再次熔铸的原料。参照ISO10993-5:2009标准要求，分别将上述4种烤瓷合金的片状测试试件使用DMEM细胞培养液进行浸提；（2）使用电感耦合等离子体原子发射光谱仪（ICP-AES）及分析软件分别检测上述4种烤瓷合金测试试件浸提液中金属离子的种类和水平；（3）分别使用上述4种烤瓷合金测试试件的浸提液培养小鼠肺结缔组织成纤维细胞（L-929），采用CCK-8法进行体外细胞毒性试验检测浸提液对L-929细胞增殖的抑制情况

7、，倒置相差显微镜观察L-929细胞的生长情况；（4）分别使用上述4种烤瓷合金测试试件的浸提液培养L-929细胞，碘化丙啶（PI）进行细胞染色，通过流式细胞仪检测各个实验组细胞周期的改变；（5）分别使用上述4种烤瓷合金测试试件的浸提液培养L-929细胞，Annexin-V-FITC/PI进行细胞荧光双染，倒置荧光显微镜观察，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：（1）经过1~3次熔铸后除第3代钴铬烤瓷合金与第1、2代相比除镓（Ga）的析出量增高外（P<0.05），各代钴铬烤瓷合金之间其他金属离子的析出量及金属离子析出的总量均无显著变

8、化（P>0.05）；经过1~3次熔铸后各代纯钛烤瓷合金之间金属离子析出的种类和水平均无显著变化（P>0.05）；经过1~3次熔铸后第3代钯基烤瓷合金镓（Ga）的析出量较第1代与第2代增高（P<0.05），第3代钯基烤瓷合金锌（Zn）的析出量较第1代与第2代降低（P<0.05）