电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织ang-1、cox-2表达影响的研究

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1、湖北中医药大学博士学位论文电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Ang--1、COX--2表达影响的研究姓名：张素勤申请学位级别：博士专业：针灸推拿学指导教师：陈邦国20120530摘要目的：脑卒中(Stroke)是由于脑血液循环障碍而引起的临床危重疾病，又称为脑血管意外，可分为缺血性和出血性两种不同类型。约有85％的脑卒中患者为缺血性脑卒中，其发病率高，预后差，是中老年人第一位致残和前三位致死原因之一，已成为人类健康的严重威胁。中医学认为，缺血性脑卒中的病机可概括为虚、火、风、痰、气、血六端，此六端在一

2、定条件下可相互作用而引发脑卒中。针刺是中国传统医学中具有代表性的非药物治疗方法，具有操作简便、安全等独特优点。针刺在治疗缺血性脑血管疾病中的疗效已在临床实践广为证实。由于血管新生在脑缺血恢复中发挥重要作用，我们拟研究电针是否可通过促进血管新生而改善脑缺血后神经功能障碍以及COX-2、hng-1的上调是否参与该血管新生作用。本研究旨在从血管新生这一角度探讨电针防治缺血性脑血管疾病的病理生理机制。方法：清洁级雄性sD大鼠随机分为电针组、模型组、假手术组，每组10只，电针组与模型组大鼠采用线栓法栓塞大脑中动

3、脉60min后恢复血流，电针组在再灌注2h后开始电针刺激(足三里、水沟、百会，疏密波，频率2Hz／15Hz，强度约lmA)30min，每隔12h重复刺激1次。再灌注24h后，采用实时荧光定量PCR法观察电针对缺血再灌注大鼠脑组织COXmRNA的影响；再灌注48h后，采用免疫组织化学法观察电针对缺血区促血管新生相关因子的影响；再灌注72h后，观察电针局灶性脑缺血再灌注大鼠行为学障碍的影响，观察电针对缺血区微血管密度的影响。结果：(1)脑缺血再灌注24h、48h、72h后，随再灌注时间的延长，模型组和电针

4、组大鼠神经体征损伤评分逐渐降低；且各时间点电针组较模型组大鼠神经体征损伤评分明显降低，统计学处理有显著性差异；病理形态学观察，可见假手术组大鼠细胞排列整齐，无水肿，未见或仅见少量炎性细胞；模型组可见缺血坏死区结构疏松，间质水肿，大量细胞坏死，核仁消失，排列紊乱；电针治疗组缺血坏死区结构较假手术组疏松，但间质水肿不明显，坏死细胞数量较模型组明显减少，排列较模型组规则。(2)假手术组未见或少见CD34阳性表达；模型组大鼠可见脑缺血区CD34阳性表达，而电针组较模型组大鼠缺血区微血管密度显著增加，统计学处理

5、有显著性差异。(3)数据分析表明假手术组大鼠几乎未见COX-2mRNA的表达，模型组可见COXmRNA表达，而电针组COXmRNA的表达与模型组比较明显降低。(4)假手术组未见或少见COX-2蛋白表达；模型组大鼠可见脑缺血区COX-2蛋白表达，而电针组较模型组大鼠缺血区COX-2蛋白表达显著降低，统计学处理有显著性差异；假手术组未见或少见Ang-1表达；模型组大鼠可见脑缺血区Ang-1表达，而电针组较模型组大鼠缺血区Ang-1表达显著增加，统计学处理有显著性差异。结论：电针可能通过抑制缺血区COX-2

6、表达、促进Ang-1等促血管新生因子表达而发挥促血管新生效应并增加缺血区微血管密度。这些效应可有效减轻脑缺血再灌注大鼠神经行为学障碍，发挥脑保护作用。关键词：血管新生；脑缺血再灌注；电针；COX-2；Ang-1EffectofeIectroacupunctureonAng一1、COX-2inratwithfocaIcerebraIischemiaandreperfusionABSTRACTSpeciaIity：AcupunctureandMoxibustionandTuinaofChinesemedi

7、CineAuthor：LAMESTHERCHEUNGS00KANTutor：BangguothenProfessorObjective：StrokeiSacriticalillnessresultsfromcerebralbloodCirculationdisorder．StrokeiSa1SOknownascerebrovascularaceident，whichisclassifiedintoischemiCStrokeandhemorrhagiCStroke．About85％ofStrokesa

8、reischemiCStroke．StrokehashighincidenceandpoorprognosiS，whichiStheleadingcauseofdisabilityandoneofthetopthreecausesofmorta1ityintheelderly．StrokeiSnowregardedasaseriOUSthreattohumanhealth．InChinesemediCine．thepathogenesiSofischem