基于电纺纳米纤维组织工程胆管支架体内实验的初步研究

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1、隶劫女◆粤硕士学位论文基于电纺纳米纤维组织工程胆管支架体内实验的初步研究专业名称：临床医学研究生姓名：李佳导师姓名：周家华主任医师本论文受江苏省卫生厅医学基金项目(H200815)资助Initialanimalstlldiesofelectrospunnanofibersbiliaryscaf．foldsfortissueengineeringAThesisSubmittedtoSoutlleastU．niVers时FormeAcade血cDegreeofMasterofMedieineBYLIJiaSupe

2、ⅣisedbyProfessorZHOUJia．huaCollegeofMedicineSoutlleastUhiVers时2012东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：期：兰旦!!二2二!}东南大学学

3、位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。论文的公布(包括刊登)授权东南大学研究生院办理。研究生签名：圣超导师签名：日期：塑!!二Z二。2，中文摘要基于电纺纳米纤维组织工程胆管支架体内实验的初步研究东南大学医学院研究生：李佳导师：周家华目的：观察不同质量比聚乳酸／羟基乙酸(

4、PLGA)胆总管支架在体外胆汁中质量、外形及微观形态变化的情况，找出在胆总管损伤中可替代胆道结构和功能的理想质量比的支架。并通过动物实验探索可降解支架修复胆道损伤的可行性和安全性。方法：(1)用静电纺丝方法制备不同质量比的PLGA纳米纤维膜，通过扫描电镜观察其微观形貌，并测定其短期体外胆汁中降解率。(2)利用可降解的静电纺丝PLGA纳米纤维设计一种简易的胆道内支架模型。以3头小型猪为实验对象，随机分配后每一头猪分别行不同的手术方法，第一头及第二头先行胆总管前壁纵形切开1．0clIl，然后第一头直接行胆总管一期

5、缝合术，第二头放置内支架后行胆总管缝合恢复胆道连续性。第三头先切除部分胆总管前壁，放置内支架后不予缝合胆总管，构建胆总管缺损修复模型。术后观察动物黄疽和胆漏情况；术后1月处死所有实验用猪，分别比较动物自身术前和术后肝酶(ALT、AST、ALP)和血胆红素的变化；观察三头猪大体标本、肝脏组织病理切片HE染色、胆管损伤部位病理形态学改变：包括HE染色、Masson染色和0【．sMA、PcNA免疫组化。结果：(1)扫描电镜照片显示电纺材料为连续的纳米纤维，纤维直径均分布在200一500IⅡn范围内，在短期(2周)P

6、LGA75／25和90／10两种比例的纤维在胆汁中没有发生明显的降解变形。(2)三头猪均顺利完成手术，术后无黄疸及胆漏发生。动物肝酶(AU’、AST、ALP)和血胆红素水平术前和术后比较无显著性差异。三头猪术后1月可见吻合口局部轻度水肿充血，未见明显狭窄，第一头及第三头猪胆管无扩张，第二头猪近端胆管轻度均匀扩张。术后1月三头猪胆管切片HE染色，镜下均可见较多炎症细胞浸润，以巨噬细胞及淋巴细胞为主，粘膜下固有层胶原纤维增生，纤维结构紊乱，可见小血管增生，第三头较第一、第二头增生的胶原东南大学硕士学位论文纤维少。

7、三组肝脏切片镜下均未见淤胆和炎性细胞浸润。M硒son染色见术后1月胶原纤维增生伴有纤维化，排列较为紊乱，第三头猪胶原增生程度最轻，排列相对有序，第一头增生最为严重。a．SMA免疫组化评分第一头最高，第三头最低。PCNA免疫组化示第三头胆管缺损区域有新生胆管上皮细胞形成。结论：(1)静电纺丝方法制备的材料为纳米纤维结构，PLGA75／25和90／10两种比例的纤维在胆汁环境中短期(2周)没有发生明显的降解；(2)在保护胆管血供、实现无张力修复的前提下，可降解静电纺PLGA支架能有效支撑、修复胆管，为胆管损伤的治

8、疗提供了一个新的材料，并且部分缺损的胆总管具有再生形成新生胆管的能力。关键词：胆汁；生物降解；可降解支架；胆管损伤；胆管缺损英文摘要Initialanimalstlldiesofelectrospunnanofibersbiliaryscaf．foldsfortissueengineeringMedicalCollege，SoutlleastUnivers时Post孕aduate：LIJiaSupe