孔雀石绿类违禁兽药检测技术优化研究及膳食暴露评估

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1、西南大学硕士学位论文孔雀石绿类违禁兽药检测技术优化研究及膳食暴露评估姓名：李晓丽申请学位级别：硕士专业：临床兽医学指导教师：刘力；苗虹20120601两南人学硕Ij学位论文摘要孔雀石绿类违禁兽药检测技术优化研究及膳食暴露评估临床兽医学专业硕士研究生李晓丽指导教师刘力副教授苗虹研究员捅要孔雀石绿、结晶紫等三苯甲烷类化学物质曾被广泛用作水产养殖过程中的杀菌剂和抗寄生虫药，其具有致突变、致畸和可能致癌的危险性，许多国家已禁止其作为兽药使用，我国农业部于2002年5月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其

2、化合物清单》中，禁用于所有食品动物，但由于缺乏有效的替代药物及受利益驱使等原因，孔雀石绿的违禁使用仍然时有发生，因此快速、灵敏、准确的检测方法是加强孔雀石绿类违禁兽药滥用监督的必不可少的工具。本文对水产品中孔雀石绿类违禁兽药的定性定量分析方法进行了优化研究，采用建立的方法对北京市场上的淡水水产品进行了检测，根据检测结果，对北京市居民对孔雀石绿的膳食暴露进行了评估。l、结合稳定性同位素稀释技术对本实验室建立的分子印记固相萃取一高效液相色谱线性离子阱质谱法(MISPE．HPLC．IT-MS)同时测定水

3、产品中孔雀石绿、结晶紫、亮绿及其代谢产物的检测方法进行了优化研究。在前处理条件不变的前提下，改变等度洗脱程序为梯度洗脱，有效地解决了MG双峰的问题：采用ESI源正离子模式进行二级和三级质谱扫描，定性更加准确：建立了混合型阳离子(MCX)固相萃取净化方法，并与分子印记固相萃取净化方法(MISPE)进行对比，MISPE具有较高的萃取选择性、灵敏度和较好的净化效果，能够有效降低基质抑制效应，但价格较贵，限制了其在实际监测中的应用。利用上述方法测定孔雀石绿、结晶紫和亮绿的决定限(CCa)和检测容量(CCB

4、)，分别在0．14．0．46．g,／kg和O．22·0．70两南人学硕fj学化论文摘要ttg／kg之间。该方法灵敏度高，定性准确，可以用于水产品中孔雀石绿类违禁兽药的定量确证检测。2、采用优化的方法对从市场采集的89份鱼类样品进行了孔雀石绿、结晶紫、亮绿及其代谢产物的检测，其中孔雀石绿的检出率为57．3％；最大值为1459．67ttg／kg；结晶紫检出率为5．6％，最大值为3．07pg／kg：未检出亮绿。3、根据监测数据，结合2009年全国总膳食调查数据，对北京市居民对孔雀石绿的膳食暴露情况进行了

5、评估。孔雀石绿对平均暴露人群、高暴露人群和极限高暴露人群的暴露边界(MOE)分别为500000、13158和432。平均暴露人群和高暴露人群不在优先管理之列，极限高暴露人群需优先管理。关键词：孔雀石绿高效液相色谱一质谱法检测暴露评估II两南人学顺lj学f口论文AbstractOptimizationofthedetectionmethodsofmalachitegreenanddietaryexposureassessmentCandidate：LIXiaoliSupervisor：Asso．Pr

6、of．LIULiProf．MIAOHongAbstractMalachitegreen(MG)andcrystalviolet(CV)，belongtotriphenylmethanecompounds，hadbeenusedworldwideasfungicideandantiparasitictopreventandtreatfishdiseasesinaquaculture．However，theyhadbeenprohibitedtobeusdedinfisheryinmanycountr

7、iesduetotheirmutagenic，teratogenicandcarcinogenicnatures．MinistryofAgricultureofChinahadcompletelybannedtheuseofMGinfoodanimalproductioninMay2002．Nevertheless，MGisillegalusedbecauseofitsexcellentantibacterial、^，itlllowcost．Sotherapid,sensitiveandaccur

8、atedeterminationmethodsforthebannedveterinarylikemalachitegreenareverynecessary．Inthisarticle，thedeterminationmethodforsuchbannedveterinaryinaquaticsasMGandCVWasoptimized．AndsomeaquaticfishproductsweredetectedformonitoringthemisuseofMGandCVusi