富硒产朊假丝酵母的制备及性能研究

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1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：二烨日期：—蔓丝止嬲苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情

2、报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文忉论文作者签名：蛰垒逛日期：鎏垒‘』导师签名：丛丛日期：塑!兰：￡富硒产朊假丝酵母的制备及性能研究中文摘要中又捅要硒(Se)是维持人体正常生命活动所必需的元素之一。缺硒可导致多种疾病的发生，通过膳食摄取足够的硒将可以对疾病起到很好的预防作用。硒的补充可以通过摄入无机硒或

3、有机硒而得以实现，但无机硒的毒性较大限制了它的广泛应用。富硒酵母富含蛋白质和B族维生素，安全性强、生物利用率高，同时有很好的自由基清除功能，能够提高机体的免疫性能、延缓衰老等优点而成为首选的补硒产品。富硒酵母的制备通常是在酵母培养过程中将一定浓度的无机硒源物质添加到培养基中，伴随着酵母细胞的生长代谢而得到富硒产品。产朊假丝酵母(Candidautilis)可用于富硒酵母的制备，其在富集硒的同时还可以在胞内积累谷胱甘肽(GSH)，因而受到了广泛的关注。高性能(高有机硒含量和高谷胱甘肽含量)富硒产朊假丝酵母由于其在补硒的同时还可以提高机体免疫力，因而将具有更广阔的市场前景和应用价

4、值。GSH是细胞内重要的抗氧化分子，在细胞抵抗自由基和毒性物质引起的损伤中起着重要的作用。近年来，随着研究的不断深入，GSH在临床医药、食品加工、化妆品以及畜牧生产中都将具有良好的应用前景。本论文以GSH积累株CutilisSZU07．01为出发菌株，以高性能(高有机硒含量和高GSH含量)富硒产朊假丝酵母的制备及性能为目标展开研究，具体研究内容如下：(1)在摇瓶和发酵罐水平上分别研究了亚硒酸钠浓度及其添加方式对高性能富硒产朊假丝酵母制备的影响。结果发现，亚硒酸钠添加浓度为15mg／L时产朊假丝酵母具有较好的富硒效果，但一次性添加对酵母细胞有较大的毒害作用。采用分批添加亚硒酸钠

5、的方法获得了高性能富硒产朊假丝酵母制备的培养条件：发酵起始添加10mmol／LL．蛋氨酸，并在发酵过程的12h、15h分别添加10mg／L和5mg／L亚硒酸钠。在此培养方式下，产朊假丝酵母胞内GSH和有机硒含量分别达到172．3mg／L和1194Pg／g。(2)采用高密度培养的方法制备富硒产朊假丝酵母。补料分批培养在显著提高酵母细胞生长、GSH合成的同时，也明显的增强了产朊假丝酵母的富硒性能。首先，考察了恒速流加、指数流加及多项式流加三种流加策略对富硒酵母高密度中文摘要富硒产朊假丝酵母的制备及性能研究培养的影响，以有机硒浓度与Se的有机转化率为指标，确定了最佳的流加方式为多项

6、式流加。在此基础上，进一步考察了亚硒酸钠的添加浓度及其添加方式对富硒产朊假丝酵母高密度制备的影响。结果表明，较低浓度亚硒酸钠添加时虽然Se的转化率较高但有机硒含量较低，而较高浓度的亚硒酸钠对酵母细胞的生长、GSH的合成以及Se的有机转化率都具有不利影响，由此确定了亚硒酸钠的最佳添加浓度为60mg／L。考虑到亚硒酸钠的添加方式对酵母细胞的富硒效果也会产生较大的影响，比较了一次性添加、分批添加和连续流加亚硒酸钠对富硒产朊假丝酵母制备的影响。结果表明，产朊假丝酵母在连续流加的培养方式下，胞内GSH产量及有机硒含量均达到最高，分别为687．6mg／L与1143．1gg／g。(3)研究

7、了富硒产朊假丝酵母对SD大鼠生理特性的影响。添加一定量的富硒酵母在促进SD大鼠生长的同时，显著增强大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．Px)、过氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活力，提高其抗氧化的能力，从而减少自由基和脂质过氧化物对细胞膜完整性的破坏；同时，富硒产朊假丝酵母还能提高SD大鼠体内淋巴细胞的转化率，从而增强了大鼠的免疫性能。关键词：产朊假丝酵母；L．蛋氨酸；谷胱甘肽；富硒酵母；抗氧化能力II作者：杨波指导教师：梁中琴、卫功元!!!￡璺!竺!堕竺!!!!!!!!竺竺：!旦!!!!!