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1、羡藜全草总黄酮加工技术［摘要］文章分析了痍藜总黄酮的最佳提取工艺条件。［关键词］疾藜总黄酮中图分类号：R23.3文献标识码：A文章编号：M藜TribulusterrestrislL.为殡藜科(Zypophy1laceae)一年生草本植物，广布全国，习称硬殡藜。疾藜全草含有皂昔类、黄酮类、氨基酸类及糖类等成分，在心血管系统及强壮、抗衰老、增强性功能等方面表现较强的活性。研究发现痰藜中黄酮类的含量是皂昔含量的1.5倍左右，所含黄酮类化合物的昔元主要为桝皮素(Quercetin)、山棊酚(Kaempferol)及异鼠李素(Isorh
2、amnetin),且以楣皮素为母核的黄酮类成分含量最高。殡藜总黄酮提取工艺的研究尚未报道。本研究采用正交实验设计，对影响痰藜总黄酮提取的因素进行了研究，为获得其最佳提取工艺条件提供实验依据。一、材料与仪器1、供试植物痪藜植物材料于200607采自宁夏盐池县,由宁夏大学生命学院植物教研室陈彦云教授鉴定为疾藜科痪藜属痰藜TribulusterrestrislL.。样品采集后自然条件下阴干，用万能粉碎机粉碎后过40目筛，储存于阴暗、干燥处。2、试剂芦丁对照品（中国药品生物制品检定所）；无水乙醇、NaN02、Al（N03）3、NaOH
3、等试剂均为分析纯。3、仪器TU-1810DSPC型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）、旋转蒸发仪（Buchi,瑞士）、SHZ-D循环水式真空泵（河南郑州长城科工贸有限公司）、电热恒温水浴锅HH.S11-2（北京长安科学仪器厂）。二、方法1、样品提取精密称取痪藜粉末2g,共计9份，参照文献，采用L9（34）正交设计回流提取，固定提取次数为3次，抽滤，合并3次滤液，减压蒸馆，回收乙醇，将提取液用无水乙醇定容于100ml容量瓶中，摇匀，作为待测原溶液。各取上述待测原溶液5ml,精密测定，置25ml容量瓶中，加适量无水
4、乙醇超声溶解，稀释至刻度，摇匀，静置。取上清液5.0ml置蒸发皿中，加入2.0g聚酰胺粉吸附，于50°C水浴中挥去乙醇，然后转入层析柱，先用25ml石油瞇洗脱，弃去洗脱液，再用无水乙醇洗脱，收集洗脱液（至盐酸-镁粉反应为阴性），置25ml容量瓶中，加无水乙醇至刻度，作为待测样品溶液。2、标准曲线的绘制精密称取在12CTC干燥至恒重的芦丁标准品5.0mg,用无水乙醇溶解，定容至100ml,得浓度为50ug/ml的标准液。分别精密吸取上述芦丁标准液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml置于10ml容量瓶中，分别加5%亚
5、硝酸钠0.3ml,放置6min,再加10%硝酸铝0.3ml,放置6min,加4%氢氧化钠4ml,加蒸馆水定容至刻度,摇匀，放置15min后，在分光光度计上于510nm处测定其吸光度，无水乙醇为空白参比。以吸收度A为纵坐标，浓度C为横坐标，进行回归分析，绘制回归曲线。结果在0〜5ug/ml的范围内，浓度与吸光度有良好的线性关系。得出回归方程：A=0.0649C+0.0012(C：ug/ml),r=0.9998O3、样品总黄酮含量测定精密吸取上述待测样品溶液1.0ml,分别置10ml容量瓶中，按照“2、”项下的方法,在510nm下
6、测定其吸光度A,按回归方程计算出提取物中的总黄酮含量。4、方法学考察精密度考察精确称取样品粉末约2g,按照待测样品制备方法制备待测样品溶液，准确吸取待测溶液1.0ml,置于10ml容量瓶中，加蒸馆水定容至10ml,按“2、”项下的方法，在510nm下测定其吸光度A,5次测定的平均吸光度为0.0613,RSD为0.67%,说明仪器的精密度良好。稳定性研究将上述溶液每隔10min测定1次吸光度，5次测定的平均吸光度为0.0662,RSD为1.21%(n=5),表明待测样品溶液在1h内稳定。重复性考察将上述溶液平行制备5份待测溶液，
7、测定其吸光度，5次测定的总黄酮得率平均为6.3mg/g,RSD为0.912%,说明方法的重复性好。加样回收率实验分别精密吸取一定量的待测样品溶液，按照上述方法测定其吸光度，计算回收率，平均回收率为100.73%,RSD为1.35%（见表1）,表明方法的回收率较好表1加样回收率实验已知样品量m/g加入对照品量m/g测定量m/g回收率（％）平均回收率（％）三、结果1、总黄酮提取方法的选择浸泡法：取痍藜粉末2g,用15倍量的80%乙醇浸泡3次，2h/次，抽滤，合并滤液回流法：取痍藜粉末2g,用15倍量的80%乙醇提取3次，2h/次，
8、抽滤，合并滤液。用以上两种提取方法提取痍藜总黄酮,依次测定其中总黄酮含量，得出回流法提取总黄酮的含量最高为6.612mg/g,其次是浸泡法为5.263mg/go故选用回流法作为殡藜总黄酮的提取方法，并通过下面正交实验选择最佳提取条件。2、总黄酮提取的正交实验在选择回流作为提取
