白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫毒杀作用的分析

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1、广西大学硕士毕业论文白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫毒杀作用的研究Oliverira)等有较高的毒杀活性【1蛐01。有关植物杀线活性物质成分鉴定及作用杌理、如何提高其活性等缺乏系统性研究。据不完全统计，植物性杀线活性物质的化学成分包括8个属，6大类化合物，其中生物碱在杀线植物中广泛分布12”。Tandon和Reddy报道

2、22】，Flemingiavestita可作用于线虫的肌肉系统。小万寿菊【23J(T．minuta)和侧柏124】(Thujaorientalis)不同部位提取液的杀线活性存在差异。我国对植物性杀线剂的研究起步较晚，大多的研究工作主要

3、集中在资源调查及活性筛选方面，杀线活性物质的化学成分及作用机制等研究很少【25以引。较早的研究是赵博光(1996)从苦豆子岱．alopecuroidel)植物中分离出的苦豆碱具有很强的杀线活性【29、301。华文艳(2001)报道【31132’，10个科14种植物提取物对松材线虫(且xylophilusNickle)、花生根结线虫(M．jarenariaChitwood)、水稻潜根线虫(HirchmanniellaoryzaeGoodey)具有杀线活性：三尖杉(Cephalotaxusfortunei)的杀线活性成分(生物碱)可作用于线虫的神经系统。杨

4、秀娟(2002)等报道【33】，提取溶剂、提取部位、光照三种因索可影响万寿菊万寿菊(T．erecta)、蓖麻(尼communis)和马缨丹(Lantanacamara)"：种植物提取液的杀线活性。白花曼陀罗(DaturametelUnrL)又名洋金花，为茄科(Solanacea)曼陀罗属(DaturaUnn．1一年生草本植物【34】，是历史悠久的中草药和杀虫植物。许多的研究P,iE实其活性物质(莨菪生物碱)具有杀虫作用，是一种铲胆碱受体阻断剂可直接作用于昆虫的神经系统达到毒杀作用【ll】。作为杀线植物仅有的报道是其水提取物能抑制南方根结线虫卵的孵化【3

5、5】，其提取工艺及提取物的活性物质、作用机制等是否与杀虫作用一致未见报道。本文开展白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫的毒杀作用，提取物对线虫生长发育的影响，影响提取物提取率及其杀线活性的因素，杀线活性成分检识及作用机制等研究。研究结果将为今后进一步利用白花曼陀罗这一杀线资源奠定基础，为可能的人工模拟合成及寻求新型杀线剂提供理论依据。广西大学硕士毕业论文白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫毒杀作用的研究1材料与方法1．1供试线虫及其分离供试南方根结线虫为笔者在南宁市郊区采集，经分离鉴定为南方根结线虫，接种在广西大学实验室网室内种植的番茄苗上繁殖备用。试验时采集

6、有根结的番茄病根，在解剖镜下挑取卵囊，置于室温孵化4．5天，得南方根结线虫二龄幼虫供试验用。1．2供试白花曼陀罗叶采集及其提取物的制备白花曼陀罗叶采自广西药用植物园内，为野生种。将收集到的白花曼陀罗叶经烘干(50。C，48h)粉碎，称取1．Og叶耪溶于10mL清水中，24h后过滤提取液，并用清水定溶至10mL；量取5mL提取液，蒸去清水，对所得千物质称重，参照阎钟坤1990年方法1361计算植物物质提取率，其余5mL提取液供杀线虫活性测定用。1．3白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫的毒杀作用1．3．1白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫二龄幼虫的毒杀作用1．

7、3．1．1毒杀浓度试验将1．2制备的提取物用清水配成1％浓度(w／v)，然后用线虫液(50-100条／mL)将提取物稀释成系列浓度(O．5％、0．25％、O．125％、O．0625％、O．03125％)，置室温下处理，48h后，检查线虫死亡率(针触法)。以清水线虫液为对照，每个处理设置3个重复．线虫死亡率计算标准参见蔡秋锦t998年方法【371，并用新复极差检验各处理的差异性【27l。最后将浓度的对数+2(x)与校正死亡率的机率值(y)回归得毒力回归方程及LC50值(机率值分析法【381)。1+3．1．2毒杀时间试验根据1．3．1．1结果，选择LC50

8、值浓度处理线虫，分别在处理后的24h、48h、72h、96h、120h检查线虫死亡率(针触法)，其它方法同1．3；1．1，最后将时间的对数(x)与校正死亡率的机率值(y)回归得毒力回归方程及LT50值。1．3．2白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫卵的毒杀作用1．3．2．1毒杀浓度试验吸取1．3．1．1已稀释的系列浓度提取液各2mL加入5mL的玻璃瓶内，然后加入10个卵囊，置室温下，处理48h后，去除药液，换成滴水，100小时后检查孵化的线7广西大学硕士毕业论文白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫毒杀作用的研究虫数，计算抑制卵孵化率。以清水为对照，每个处理设置

9、3个重复，其它方法同1．3．1．1。L3．2’2毒杀时间试验根据1．3．2．1结果，选择LC5