1317罗伯逊易位猪染色体瑞粒的研究

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1、TheResearchofTelomere011Swine13／17RObertsonianTranslocationThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversityInR山眦伽ItoftheRequirementMasterofAgronomy(DepartmentofAnimalScienceandTechnology)Supervisor：SunJ'mhaiQingdao．ChinaJune，2012独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包

2、含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：这订色遁时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阕，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：逮蠢拖时间：年月日导⋯：必专场帆年月日青岛农业大学硕士论

3、文摘要端粒是存在于线状染色体末端的DNA重复序列，它是线状染色体末端的一种特殊结构，由富含GC碱基的DNA简单重复序列及端粒结合蛋白共同构成。端粒具有维持染色体末端结构稳定，防止染色体间末端连接，并且可补偿滞后链5’末端在消除RNA引物后所造成的空缺的生物学功能。端粒DNA在染色体上的组成及变化一直都是生物研究的一个重要方面，对13／17罗伯逊易位染色体端粒的研究可以为研究罗伯逊易位的相关遗传机理提供研究资料。本研究采用HaeIII和Hinfl内切酶对提取的猪组织基因组DNA样进行双酶切，将酶切产物进行回收连接，根据己知的端粒简单重复序列(TTAGGG)。，通过Primer5．0设计出

4、三条引物，以连接产物为模板进行两次PCR，纯化回收PCR产物，将其连接到pMDl8·T载体上，挑取阳性克隆进行测序。将得到的端粒简单重复序列作为探针，采用地高辛随机引物标记法标记探针，对13／17罗伯逊易位猪的染色体标本片进行荧光原位杂交，以检测罗伯逊易位染色体新着丝粒区域是否存在端粒简单重复序列。阳性克隆子的测序结果显示，95～341bp为端粒简单重复序列，因此采用此246bp序列作为荧光原位杂交的探针。荧光原位杂交的检测结果显示，在染色体的两端显示杂交信号，但在13／17罗伯逊易位染色体着丝粒区域不显示杂交信号，说明在13／17罗伯逊易位染色体着丝粒部位发生了端粒序列的缺失。定位出

5、13／17罗伯逊易位新染色体融合部位发生了端粒序列的缺失，可为进一步研究端粒序列的缺失对13／17罗伯逊易位猪的生产性能产生的影响提供参考，从而为深入研究罗伯逊易位的分子机理提供研究材料。关键词：家猪；端粒；13／17罗伯逊易位；荧光原位杂交重曼壅些盔堂堡主迨奎一垒!墅型．Abst耐TelomeresarerepeatedDNAsequencesexistintheendoflinearchromosomes，itisaspecialstructureoftheendoflin髭rchromosomes．constitutedoftheGC-richbasepairsofDNAsimp

6、lesequencerepeatsandtelomere-bindingprotein．Thebiologicalfunctionsoftelomeresismaintaintheendsofchromosomesstructuralstability，preventtheendoftheconnectionbetweenthechromosomeandcancompensateforthelaggingstrand5’endofthevacancycausedintheeliminationoftheRNAprimer．Thecompositionandchangesofthetel

7、omericDNAinthechromosomesisanimportantaspectofthebiologicalresearch．Researchingof13／17robertsoniantranslocationchromosometelomerescanlavttlefoundationforthegeneticmechanismofRobertsoniantranslocation．Inthisstudy，thegenomicDN