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1、梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍改善作用［摘要］目的：探讨梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍的改善作用。方法：大鼠给药14d后开颅窗，利用高分子葡聚糖复制实验性微循环障碍模型，生物显微镜下观察记录给药后各组大鼠不同时间点软脑膜微动静脉直径，激光多普勒血流仪监测血流量，电阻法测红细胞压积，全自动血液流变仪测流变学指标。结果：梓葛冻干粉针（16.40,32.70,65.40mg-kg-1）能显著扩张软脑膜的微动静脉内径、改善血流量下降的趋势和降低血液流变学各项指标。结论：梓葛冻干粉针具有改善脑部微循环的作用。［关键词］梓葛冻干粉针；高分子葡聚糖；脑微循环障碍；血流量；血液流变
2、学脑微循环是维持脑中枢调节功能的重要保证条件之一。许多脑血管疾患的发生、发展都与脑微循环功能紊乱有密切关系［1］。而微循环障碍主要指微血管的结构、形态、功能障碍和微血流异常以及血液流变性紊乱，同时也包括淋巴微循环以及组织液流动性的障碍［2］。梓葛冻干粉针为课题组自主研制的治疗缺血性脑卒中的中药单体复方制剂，主要由葛根素和梓醇组成。课题组已对其改善气虚血瘀证［3］、血脑屏障通透性［4］及脑缺血的体内外模型的作用［5-7］等进行了研究，但该制剂对脑部微循环是否有影响，尚未有实验性的报道。本实验目的旨在观察梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍是否具有改善作用，并为梓葛冻干粉针的临床
3、应用提供参考。1材料1.1动物SD大鼠120只，雄性，体重（220±20）g,SPF级，由重庆医科大学实验动物中心供应，合格证号SCXK（渝）2007-0001,于西南大学药学院SPF级实验动物中心饲养，许可证号SYXK（渝）2009-0002o1.2药品与试剂梓葛冻干粉针（西南大学中药研究所,批号20120401）；尼莫地平（德国拜耳医药保健有限公司，批号BXG2G72）；高分子葡聚糖T-500（瑞典Pharmacia,货号17-0320-01,相对分子质量50万）。1.3仪器全自动血液流变快测仪（重庆大学维多生物工程研究所）；半自动血液分析仪（日本东亚仪器有限公司）;M
4、L191激光多普勒血流量仪（澳大利亚ADInstruments公司）和PowerLab数据采集分析系统；牙科钻；LEICAM205C生物显微镜，LAS软件（ver4.0）。2方法2.1动物分组及给药120只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照尼莫地平注射液0.20g-L-1组（临床成人70kg用量为23mg-dT,大鼠的等效剂量约为2mg-kg-1-d-1）以及梓葛冻干粉针（溶于生理盐水）1.64,1.27（按人临床体表面积折算的等效剂量），6.54g•L-1组,每组20只，每组再随机分为3个亚组，即测微血管亚组（5只）、脑血流量亚组（5只）和血液流变学亚组（10只
5、）。各组尾静脉注射给药，每天1次（10mL•kg-1）,连续14d,正常组和模型组同时尾静脉注射等体积的生理盐水。2.2颅骨骨窗的制作末次给药后立即制作颅骨骨窗。参照文献方法[8-9],将用3.5%水合氯醛腹腔麻醉的大鼠剃去颅骨顶部毛，75%乙醇消毒，俯卧位固定在头颅立体固定架上，沿脑颖顶部正中线剪开皮毛,暴露顶骨。选择一侧大脑半球用骨钻开一矩形窗口，直径约为2mmX2mm大小的颅窗。两侧留出足够的宽度（内侧离矢状缝0.5mm,外侧离横窦0.5mm）,避免损伤矢状窦，清洁窗口周围骨表面的血迹及液体渗出，显微镜下小心剥离硬脑膜，露出软脑膜。颅骨骨窗制作后进行造模前各项指标观察
6、。2.3微循环障碍模型造模方法末次给药30min后，参照文献方法[I,10],除正常组，其余各组大鼠再经股静脉给予10%高分子葡聚糖T-500（10mL-kg-1）造成微循环障碍模型。2.4软脑膜微血管观察在100W卤灯斜落射照明下，选择颅窗内细动脉和细静脉清晰部位，用LEICAM205C生物显微镜观察并记录软脑膜血管直径变化。观察记录造模前5min和造模后1,5,10,20,40,60min时间点大鼠脑血管微静脉与微动脉血管的直径。采用LEICAM205C生物显微镜中LAS(ver4.0)图象分析软件分别测定细动脉和细静脉的血管内径。以给葡聚糖前的血管直径为基准值，用给葡
7、聚糖后各时间点血管直径与基准值的比值反映各组动物脑微血管的变化趋势。2.5脑血流量测定颅窗制备完毕后，将激光多普勒血流仪探头固定于颅窗处，并维持探头在整个实验过程中无位移及转动，记录该区造模前5min和造模后5,10,20,40,60min时的脑组织激光多普勒血流量(laserDopplerflow,LDF),以灌注单位(per-fusionunit,PU)表示。由于每只大鼠的血流基准值不同，激光多普勒血流仪所测的血流值为相对值，仅适用于同一个体同一测量点的连续监测，不同个体间的横向比较应以激光多普勒血流仪所测的血
