lps处理对猪背最长肌能量代谢的影响与其机制分析

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1、万方数据摘要LPS对猪背最长肌能量代谢的影响及其机制研究本实验旨在探索LPS模拟的炎症模型下，猪背最长肌中能量代谢的变化，以期能全面的评价炎症对猪骨骼肌的影响，并阐明可能的机制，为今后找到合适的缓解治疗药物提供理论基础。实验分为两组：正常对照组和LPS处理组，分析肌肉中ATP、ADP等的浓度，研究LPS处理后肌肉糖酵解水平、线粒体功能和内质网功能的变化情况，并检测了胞浆和线粒体中钙离子浓度的变化；此外还分析了LPS处理对肌肉生长分化相关调节因子基因表达情况的影响。1LPS处理对猪背最长肌能量代谢的影响选择12±0．5kg的雄

2、性杜X长X大三元仔猪12头，按体重相接近随机分为2组：对照组和LPS(15gg／kgBW)j!i射组，对照组注射相同体积的生理盐水。注射6h后屠宰采样，用含抗凝素的EP管收集颈部静脉血液样品，并制得血清同采集的肌肉组织一并放入．80℃冰箱保存。利用全自动生化分析仪，检测血液中的血糖和乳酸含量；利用高压液相检测肌肉组织中ATP、ADP等能量基本物质的含量；利用试剂盒检测了相关酶活和钙离子浓度；并利用RT-PCR和WesternBlot技术检测了相关基因、蛋白的表达水平。结果显示，LPS注射6h后血糖并没有发生显著性变化，但是血

3、液中乳酸却显著性上升。NADH的含量显著性上调(P<0．05)，NADH／NAD+的比值和ATP的含量有上升的趋势(P=n064)；ATP、ADP、AMP和NAD+无显著性变化。糖酵解的大部分关键基因都显著性上升(P<0．05)；糖酵解通路的3个关键酶HK、LDH和PK的酶活都显著性上调了(P

4、网功能之间相互偶联，我们检测了内质网的状态，结果显示内质网应激的大部分基因都显著性上调，标志性蛋白BIP显著性下降(P<0．05)，CHOP蛋白显著性上调(P<0．05)。钙离子的检测结果显示，细胞内总体钙离子的浓度无显著万方数据LPS对猪背最长肌能量代谢的影响及其机制研究性变化，但是线粒体内的钙离子浓度显著升高(P<0．05)。我们的结果提示LPS处理显著增强了肌细胞的糖酵解途径，并可能通过内质网和线粒体之间的钙交流，介导了肌细胞线粒体的功能紊乱。2肌肉注射LPS对猪背最长肌生长相关基因的影响选择12头体重约为12±O．5

5、始的雄性杜X长X大三元仔猪，并随机分为2组：对照组和LPS(15gg／kgBⅥ注射组，对照组注射相同体积的生理盐水。注射6h后屠宰采样，样品保存于．80"C冰箱。RT-PCR的结果显示LPS处理组IGF．1的基因显著性下降(P

6、1和MuRF．1的基因显著性上调(P<0．05)。蛋白检测的结果显示MuRF-1无显著性变化。MSTN的基因和蛋白表达水平均无显著性变化。检测MRFs家族的基因和蛋白表达，结果显示MyoD和MyoG都显著性下降(P<0．05)，而Myf5和Myf6的基因显著性上调(P<0．05)。MyoG、Myf5和Myf6的蛋白检测显示其表达均无显著性变化。我们的结果提示LPS注射后显著下调了IGF．1的表达，同时也增加肌肉萎缩的自噬和泛素蛋白酶系统相关基因的表达，可能对肌肉生长产生不利影响。关键词：猪；LPS；背最长肌；糖酵解；线粒体Ⅱ

7、万方数据ABSTRACTTHEEFFECTOFLPSONENERGYMETABOLISMINTHESKELETALMUSCLEOFPIGThisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectofLPStreatmentonmuscleenergymetabolismandgrowthinpigs．Understandingtheseunderlyingmechanismsmayprovidenewtherapeuticstrategiesfortreatingmetabolicdiseasesindu

8、cedbyLPSinmuscle．1TheeffectofLPSinjectiononenergymetabolisminpigLDmuscle．Weemployed12growingpiglets(LargeWhitexLandracexDuroc)withanaveragebodywe