糖尿病血管内皮细胞损伤与β淀粉样肽的相关性研究

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1、糖尿病血管内皮细胞损伤与13淀粉样肽的相关性研究计：学位论文：37页表格：9个插图：7幅许静宜指导教师：杜建玲教授申请学位级别：硕士学位专业名称：内科学论文提交日期：2012年4月论文答辩日期：2012年5月学位授予单位：大连医科大学学位授予日期：2012．年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明删Y2283274本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学

2、或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：盗鳌窒签字日期：韭年羔月兰日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·-"-4二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8(一)前言⋯OtlDODOO·DOD⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8(一)月IJ舌⋯

3、””⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯．．一8(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯··28(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37糖尿病血管内皮细胞损伤与13淀粉样肽的相关性研究硕士研究生：指导教师：指导小组：专业名称：许静宜杜建玲教授门莉莉讲师内科学摘要目的：利用2型糖尿病患者(type2diabetesmellitus，T2DM)血清干预人脐静脉内皮细胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells，HUvECs)，观察干预后上清液中丙二醛(maleicdial

5、dehyde，MDA)、过氧化物歧化酶(superoxideDismutase，SOD)和一氧化氮(nitricoxide，NO)的水平及p淀粉样肽(amyloid-p，AS)40、A1342水平的差异，探讨T2DM患者血清对内皮细胞的损伤及其与A肛O和A[j42的相关性。方法：1．选取T2DM患者和健康对照者各10例，收集相关资料；培养HUVEC，分别暴露于10％糖尿病患者血清(diadeticserum，DS)、10％健康人血清(healthserum，HS)及10％胎牛血清(fetalbovine

6、serum，FBS)中。2．倒置显微镜观察干预30min、3h以及3d时的细胞形态学变化；四甲基偶氮唑蓝法(multiply-tabletournament，MTT)观察干预3d时各组血清对细胞生存率的影响3．干预30min、3h、3d后分别取各组细胞上清液，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力，评定细胞抗氧化能力；硫代巴比妥酸法测定MDA含量，评定脂质过氧化情况；ELISA法测定NO浓度，了解内皮功能；ELISA法检测AIB40和A1342的含量，探讨DS血清对内皮细胞的损伤与AJ340和AJ342的相关性。

7、结果：1．细胞形态学变化在30min及3h时各组细胞形态未见明显变化，3d时FBS组和HS组可见细胞结构、形态清楚，大小均匀，呈单层鹅卵石形状紧密排列，DS组可见细胞变圆、皱缩、胞体碎裂，细胞数量减少、排列紊乱。2．各组生存率的变化各组细胞生存率与FBS组比较，均无显著性差异(P>0．05)，与HS组(133．33士37．53)比较，DS组(77．46士21．32)细胞生存率显著降低(P--0．000)r。3．HUVECs培养上清液中SOD、MDA以及NO的变化3．1I)S组HUVECs上清中SOD活力

8、降低在同一时间段，分别在干预30rain、3h、3d，FBS组与HS组比较SOD的活力无显著性差异(P>O．05)；在干预3h时，DS(25．63+4．50)与FBS(30．67+2．06)和HS(31．08+4．90)比较，能明显增加SOD活力(P值分别为0．006，O．003)；在干预3d时，DS(20．67+4．24)与FBS(31．39+1．29)和HS(33．8+5．47)比较，能显著增加SOD活力(P值分别为0．000，0．00