乙型脑炎病毒对猪外周血淋巴细胞因子mrna转录时相影响的研究

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1、西南大学硕士学位论文乙型脑炎病毒对猪外周血淋巴细胞因子mRNA转录时相影响的研究姓名：罗线连申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：彭远义；魏战勇20120601摘要乙型脑炎病毒对猪外周血淋巴细胞因子mIm转录时相影响的研究预防兽医学专业硕士研究生罗线连指导老师彭远义教授，魏战勇副教授捅要猪乙型脑炎病毒(Jap锄eseEncephalitisVims，正V)是母猪繁殖性能障碍的重要病原体，JEV又经常同许多病毒交叉感染对养猪生产带来好多弊端，所以加强对JEV的研究工作，意义显得十分重要。l我们利用实时定量PCR分别对正V感染外周血单层淋巴细胞JEVI矾A及Bcl．2、Bcl．xl、

2、F弱L、p53和PBR五种凋亡相关细胞因子含量进行检测，结果显示：在感染1小时，病毒DNA表达量开始出现，病毒可以测出，在感染后期72小时能达到最大值，此时DAN的相对表达量达到16倍左右：BcI．2感染1小时后开始增殖，在3小时大量表达，随后降低。F硒L感染72小时后增加到峰值，Bcl．xl感染l小时、12小时、24小时、48小时后表达量降低，3小时、72小时大量表达分别为对照组的4．8倍、560倍；P53感染l小时、3小时、12小时、24小时、48小时后表达量不明显，72小时后表达量达到最大值为对照组15倍；PBR感染l小时、3小时、12小时、72小时后大量表达分别为对照组的1．5

3、倍、7．7倍、9倍、83倍，24小时和48小时表达量降低。2我们分别对JEV感染淋巴单层细胞后IL．8、12p40、12P35及IL．17、IL．18相关细胞因子水平进行实时定量PCR检测，结果发现IL．8感染1小时、3小时、24小时、72小时后大量表达，分别是对照组的1．7倍、lO倍、3．2倍、2．8倍，12小时、48表小时达量降低；12p40感染l小时、3小时、12小时、24小时后分别为对照组的1．6倍、5．7倍、5．3倍和1．9倍，接着在48小时表达量降低，72小时甚至不表达：12p35感染l小时开始表达，3小时表达降低，12小时、24小时表达量都增加，48小时表达量达到峰值，约

4、73倍左右，72小时表达量降低；lL．17感染1小时、3小时、12小时后与对照组相比表达量增加的幅度不明显，24小时、72小时甚至不表达，48小时表达量大量增殖；IL．18感染1小时开始表达，3小时大量表达，12小时、24小时、48表小时达量增高趋势，在72小时表达量达到峰值，约为7．8倍。两南大学硕十学位论文3我们利用实时定量PCR分别对JEV感染淋巴单层细胞后MIP．1旺、TGF—p1、PGKl分泌水平进行检测，结果发现MIP．1a感染l小时后开始表达，3小时大量表达，12小时、24小时、48小时都不表达，72小时表达值达到峰值；TGF．1B感染l小时、3小时、72小时后与对照组相

5、比表达量有增殖趋势，分别为1．1倍、1．09倍、3．6倍，12小时、24小时、48小时后与对照组相比表达量都降低：PGKl感染l小时、12小时、24小时后与对照组相比表达量不显著，在3小时、48小时表达量降低，72小时大量表达。总之，对JEV感染猪外周血淋巴单层细胞部分因子转录时相进行研究，目的就是掌握细胞因子的免疫学作用原理及JEV的分子作用机制，为预防和治疗厄V提供理论基础。Ⅱ关键词：JEV；细胞因子：淋巴细胞；PCR^bstractImpactofJapaneseEncephaIitisVirusonm砌、『Aexpressionprocjneinperipheralbloodl

6、ymphocyteculturesofswineSupeⅣisor：Pr0￡Pengyu柚yi，AssocialePro￡Weizh锄yongMaSterc醐dida￡e：LuoXianli勰ABSTRACTJ印锄eseEncepMitiSViruS(JEV)waS锄imponantpamogeniIlr印roductiVedistu】出a芏lceofsows，嬲doRenmixedinfection晰thm锄yVimses，itcouldbringalotofdisadV锄taget0deVelopmentofpigindusny，itisveryirnportanttos仃en咖e

7、nthe陀scarchOnJEV．1Byqu龇itatiVereal—timePCR龇厄VRNAlevelsandgeneexpressionlevelsof5cellulargenes(Bcl—2、Bcl·x1、F懿L、p53andPBR)of1)，IIlphocytesweredetected心erinfection、)I，inlJ印ane∞EncephalitisViruS，result碉．er如hollr州tllJEVi疵cted，me