cpg odn2395对新生小鼠mcmv感染免疫功能的影响

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1、徐州医学院硕士学位论文CpGODN2395对新生小鼠MCMV感染免疫功能的影响姓名：曹杨申请学位级别：硕士专业：儿科学指导教师：王军2012-02徐州医学院硕士学位论文CpGODN2395对新生小鼠MCMV感染免疫功能的影响示≯HIⅧ中文摘要目的用腹腔注射小鼠巨细胞病毒(murinecytomegaloVims，MCMV)的方法建立BALB／C小鼠全身型MCMV感染模型。分为空白对照组、MCMV组和CpGODN2395治疗组，通过对一些体液免疫指标的对比，以明确体液免疫在新生小鼠MCMV感染中的作用，为今后CMV感染的治疗及药物的研究提供理想的亚厶l口。方法

2、将出生3天内的新生BALB／C小鼠随机(随机数字表)0DN2395治疗组，每组30只。对照组：腹腔注射0．9％氯化钠20“1隔日1次；感染组：腹腔注射MCMV20¨11次，从接种M(：MV当日起隔日腹腔注射0．9％氯化钠20¨l；CpGODN2395治疗组：腹腔注射MCMV20u11次，从接种MCMV当日起隔日腹腔注射CpGODN239520mj班g。每组分为3天、7天、14天三个亚组，每亚组10只。饲养期问，母乳喂养，每日观察小鼠的生长发育情况。分别在3、7、14天断髓处死小鼠，留取血清及肝、脾组织，经处理后行病理观察、PCR、westenl及ELISA分

3、析。结果1．MCMVSmith毒株的TCII)50=105·31／m1。2．MCMV-DNAPCR结果空白对照组肝脏MCMV-DNAPCR未出现阳性条带，其余两组均出现阳性条带，MCl以V组在3、7和14天时肝脏组织MCMVDNA含量比较差异无统计学意义(P>0．05)。Cp(j0DN2395治疗组肝脏组织MCMVDNA含量在7天时达高峰，14天时明显下降，三个时间点肝脏组织MCMVDNA含量均低于感染组(卜<0．05)。3．病理切片结：果MCMV感染新生小鼠3天时肝脏组织HE染色可见炎性细胞浸润，肝细胞肿胀变性，表现为体积变大、胞浆空淡；7天时病变加重达高

4、峰，气徐州医学院硕士学位论文可见大泡性脂肪变，大量炎性细胞浸润，肝细胞大片状坏死；在第14天仍保持较高水平。0DN2395治疗组3天时肝脏HE染色与MCMV组类似，7天时肝脏l{E染色亦可见大泡性脂肪变、炎性细胞浸润，但14天时肝细胞肿胀、变性较MCMV组明显好转，仍有炎性细胞浸润。4．空白对照组死亡率较其他组低、生长发育情况(体重、身长、毛发色泽、精神及食欲等)较其他组好，而CpGODN2395治疗组较MCMV组死亡率低生长发育状况良好。5．West‘强1blot法测各组肝脏TLR9蛋白均出现阳性条带，其中MCMV组同一时间点均较空白对照组高(P

5、)。CpGODN2395治疗组同一时间点表达高于对照组和Ⅳ[CMV组，7天时MCMV组和CpG0DN2395组表达高于3天、14天(P<0．05)。6．各组肝、脾脏IL．4、IL．6mRNA均出现阳性条带，同一时问点MCMV组表达较空白对照组高(P<0．05)。CpGODN2395组在各时问点均较其他两组表达高，在7天时MCMV组和CpG0DN2395组较3天、14天高(P<0．05)。肝脏和脾脏两指标的表达趋势一致。7．ELIsA法测小鼠血清中空白组IL．4、IL．6表达在各时间点无明显差异，同一时间点MCMV组表达较空白对照组高(P

6、DN2395组在各时间点均较其他两组表达高，在7天时MCMV组和CpGODN2395组较3天、14：天高(P<0．05)。同样方法测血清中谷丙转氨酶(ALT)，空白对照组与MCMV组和CpGODN2395治疗组相比差异有统计学意义(P

7、医学院硕士学位论文治疗作用关键词新生小鼠；先天性MCMV感染；体液免疫；cpGODN2395；徐州医学院硕士学位论文————————一—————————————————————————————————————一——TheeffectofCpGoDN2395tothenewbornmiceinfectedbyobjectiveMCMVonimmuneAbstractTbexplorethee丘bctsandmechanismsofhumoralimmumtyinthesystemicin：fectionmodelofnewbomBALB／Cmicewithmu

8、rinecytomegaloviIus(McMV)Ⅱ