木蹄层孔菌lac的酶学性质研究 毕业论文

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1、木蹄层孔菌Lac的酶学性质研究摘要本文对木蹄层孔菌漆酶的酶学性质进行了研究。结果如下：以ABTS作为底物，酶反应的最适温度为50℃；最适pH值为3；在40°C以下保持酶活力相对稳定，50°C酶活性基本全部丧失；在pH值3.5~4范围内保持相对较高的酶活力。10mM/L的Ba2+、Ca2+、Co+、Fe3+、Na+、K+这六个金属离子对漆酶酶活有较强的抑制作用，其中Fe3+的抑制作用最强，而Mg2+，Cu2+对两种漆酶均有激活作用。以ABTS为底物时，漆酶的Km值为0.05mmol/L。关键词：木蹄层孔菌，漆酶，酶学性质IIIENZ

2、YMATICPROPERTIESSTUDYOFTINDERFUNGUSLACCASEABSTRACTInthispaper,thetinderfungusenzymologypropertiesoflaccasewerestudied.Resultsareasfollows:toABTSassubstrate,theenzymereactionoftheoptimumtemperatureis50℃;TheoptimalpHvalueis3;Enzymeactivitystabilizationareunder40°C,basic

3、allloseenzymeactivityunder50°C;WithinthescopeofthepHvalueof3.5~4remainedrelativelyhighenzymeactivity.10mm/LCo+,Ca2+,Ba2+,Fe3+,Na+,K+thesixmetalionsonlaccaseenzymeactivityhadastrongerinhibitoryeffect,oneofthestrongestinhibitoryeffectofFe3+,andMg2+,Cu2+effectontwokindso

4、flaccaseareactivated.ABTSassubstrates,laccaseKmvaluetendencyfor0.05L.Keywords:tinderfungus，laccase，enzymaticpropertiesIII目录第1章绪论11.1木蹄层孔菌国内外研究进展11.2漆酶国内外研究进展11.2.1漆酶理化性质21.2.2漆酶的应用3第2章材料和方法42.1实验材料与仪器42.1.1菌种42.1.2实验材料、试剂42.1.3实验仪器52.2实验方法52.2.1木蹄层孔菌的培养52.2.2粗酶液的制备62.

5、2.3漆酶酶学性质62.2.5数据统计和分析7第3章结果与分析83.1最适反应pH值及pH稳定性83.2最适温度及热稳定性93.3金属离子及抑制剂对漆酶活性的影响103.4Km11第4章讨论12致谢12参考文献12III第1章绪论1.1木蹄层孔菌国内外研究进展木蹄层孔菌(Fomesfomentarius(L.:Fr.)Kick.)是一种多孔菌科的高等药用真菌，是世界性分布的木腐性真菌[1]。它们生长在北美洲及欧洲的桦木属及水青冈属。单一颗树上就可以有多个子实体。木蹄层孔菌并不能食用，由于其担子果可以阴燃几个小时，故可以用来点火。子

6、实体大至巨大，马蹄形，无柄。多呈灰色，灰褐、浅褐色至黑色，有一层厚的角质皮壳及明显环带和环梭，边缘钝。菌管多层，软木栓质，多年生，生于栎、桦、杨、柳、椴、榆、水曲柳、梨、李、苹果等阔叶树干上或木桩上。子实体和菌丝体中都含有许多具有生物活性的物质，代表物质就是木蹄多糖[3、4]。往往在生境阴湿或较黑暗的生境出现棒状畸形子实体。分布于我国香港、广东、广西、云南、贵州、河南、陕西、四川、湖南、湖北、山西、河北、内蒙古、甘肃、吉林、辽宁、黑龙江、西藏、新疆等地区[2]。在18世纪和19世纪，木蹄层孔菌曾被用来作为止血的膏药，在一些传统的药

7、典中被用来作为针灸的工具[5]。在中国和亚洲其他许多国家，木蹄子实体水煎服广泛用于治疗食管癌、胃癌、口腔溃疡、肠胃失调、发炎和各种感冒等疾病[6-7]。国内外对木蹄的研究结果表明，木蹄具有显著抑制肿瘤细胞生长、增强机体免疫功能和抗氧化等功效。目前，对木蹄层孔菌的研究主要是对其甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚、正丁醇的提取物的抗肿瘤活性进行研究[5]。有学者对木蹄层孔菌子实体化学成分做研究表明其含有酚、有机酸、苷类等[8]。研究表明其子实体和菌丝体中都含有许多具有生物活性的物质，其中的多糖具有抗肿瘤和免疫刺激活性。1.2漆酶国内外

8、研究进展漆酶即多酚氧化酶，是一种蓝色多铜氧化酶家族的糖蛋白氧化酶，它利用分子氧作为氧化剂，氧化木质素中酚型单元成为酚氧游离基，同时还原分子氧生成水。在ABTS存在时，能氧化木质素中的非酚型单元，并且其催化过程不需要H2O2参与，因此它在催化木质素降