杜仲中松脂醇二葡萄糖苷的相关研究

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1、河南大学硕士学位论文杜仲中松脂醇二葡萄糖苷的相关研究姓名：吴慧敏申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：李钦201205摘要本文测定了杜仲、杜仲叶、杜仲韧皮部及木栓层、杜仲香菇中松脂醇二葡萄糖苷的含量，以及不同采收期的杜仲药材指纹图谱研究和大孔吸附树脂提取纯化的工艺研究。用HPLC方法测定杜仲、杜仲叶、杜仲韧皮部及木栓层、杜仲香菇中松脂醇二葡萄糖苷的含量；不同产地光皮型全杜仲中不同部位松脂醇二葡萄糖苷的含量分析和4种变异类型杜仲韧皮部及杜仲木栓层中松脂醇二葡萄糖苷的含量分析，所用的色谱条件为：色谱柱：Diamonsil．C18柱(5“m，150mmx4．6mm)；流动相：甲

2、醇-水(23-77)；流速：1．0ml／min：柱温：室温；检测波长：277nIIl；进样量：5ul。通过方法学的考察，此方法适用于测定杜仲中、杜仲叶中、杜仲韧皮部及杜仲木栓层、杜仲香菇中松脂醇二葡萄糖苷的含量。结果得到：杜仲、杜仲叶、不同产地光皮型杜仲、不同变异型杜仲韧皮部中松脂醇二葡萄糖苷的含量分别为0．241％、0．0434％、0．36％、0．20％、0．26％、0．23％、0．30％、0．28％、0．26％、0．22％；杜仲木栓层及杜仲香菇中没有检测到松脂醇二葡萄糖苷成分：不同变异类型杜仲中韧皮部所占重量有明显差异，光皮型所占比例最低，为6．3％，龟裂型所占比例最高

3、，为13．6％。通过对不同采收期的杜仲药材进行指纹图谱研究，考察不同的提取方法对杜仲中松脂醇二葡萄糖苷得率的影响；经过料液比的考察，选取影响提取效果的三个主要因素超声时间、乙醇浓度、超声次数等，根据正交试验表进行试验，计算松脂醇二葡萄糖苷的得率。结果表明，不同采收期的杜仲药材进行指纹图谱研究，最佳的工艺为：提取溶剂为60％乙醇是样品质量的15倍，提取时间为40分钟，超声提取次数为1次。通过指纹图谱相似度评价可以看出，各批次之间及各批次与对照图谱之间的相似度较高，均大于93％，因此，所考察的11批同一产地不同时期的杜仲药材的质量较稳定；本实验具有较好的精密度、稳定性、重复性，

4、所以此方法可以对杜仲药材进行质量控制。杜仲提取工艺中，通过验证文献报道的回流提取的方法，与药典方法测定的松脂醇二葡萄糖苷含量进行了比较，考察不同的提取方法对杜仲中松脂醇二葡萄糖苷得率的影响。回流提取条件下得到的杜仲中松脂醇二葡萄糖苷的得率为0．3421％，药典方法提取条件下得到的杜仲中松脂醇二葡萄糖苷的得率为0．3448％，结果显示没有显著差异。最终确定文献报道的回流提取为最佳工艺条件，其条件为：提取溶剂为60％乙醇，样品质量与提取溶剂体积比为：1：15，提取两次，每次1．5h，提取温度800C。杜仲纯化工艺研究中，通过静态吸附和静态解吸附实验，从D101，AB一8，D40

5、20，NKA．II，X．5几种大孔吸附树脂中选择合适的吸附树脂。通过吸附和解吸附实验选择最佳的解吸附溶剂，再通过动态吸附选择了最佳的上样条件；考察水除杂所用的体积，再用选定的溶剂进行洗脱，考察洗脱剂所用的体积，最后得到洗脱液，收集到的洗脱液经过冷冻干燥，得到了杜仲的提取物。大孔吸附树脂纯化杜仲中的提取液考察的结果：选用D101型大孔吸附树脂，确定松脂醇二葡萄糖苷的纯化工艺条件为：取松脂醇二葡萄糖苷提取液(O．29／ml生药)，上样液体积与树脂的质量之比为5：l；用40％乙醇为洗脱剂，水除杂的体积与树脂的质量之比为7：l，洗脱液的体积与树脂的质量之比为8：l，洗脱液浓缩至小体

6、积的量，洗脱液经过冷冻干燥，得到了黄色的杜仲提取物，经过纯化后提取物中松脂醇二葡萄糖苷的纯度超过了50％。关键词：杜仲皮；松脂醇二葡萄糖苷；指纹图谱；大孔吸附树脂；提取纯化ⅡABSTRACTDeterminationofPinoresinolDiglucosidewithinEucommiaulmoidesOliver，EucommiaulmoidesOliverleaves，EucommiaulmoidesOliverskinsandEucommiaulmoidesOlivermushroom；researchonfingerprintofEucommiaulmoides

7、Olivermedicineindifferentcollectingtime，andresearchonextractionandpurificationofadsorptionresin．UseHPLCmethodfordeterminingthePinoresinolDiglucosidewithinEucommiauimoidesOliver，EucommiaulmoidesOliverleaves，EucommiaulmoidesOliverskinsandEucommiaulmoidesOlivermu