大叶钩藤药学药的理学实验研究精选

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1、南方医科大学级硕士学位论文大叶钩藤药学及药理学实验研究课题来源:国家自然科学基金项目.业专名称中药学学位申请人陈文倩指导教师莫志贤教授马骥教授答辩委员会主席于荣敏教授答辩委员会成员刘法锦研究员张继平教授游文玮教授马骥教授蔡红兵副研究员彭康教授莫志贤教授论文评阅人于荣敏教授张宏伟副教授年月日广州硕士学位论文大叶钩藤药学及药理学实验研究硕士研究生:陈文倩指导教师:莫志贤教授马骥教授摘要研究背景大叶钩藤砌.属于茜草科钩藤属植物,中华人民共和国药典》年版收载,作为中药正品钩藤来源的一个种。大叶钩藤主要分布于广东、广西、云南等省,具有清热平肝、息风定惊之功效,是中医临床治疗肝风内

2、动,惊痫抽搐的常用中药。作为中药钩藤,传统的药用部位是带钩茎枝,但最近的研究发现钩藤叶这一部位的化学成分与带钩茎枝相似,并且钩藤叶远比钩藤带钩茎枝的产量高,可见钩藤叶作为一种药用资源,来源丰富,药用价值及综合利用潜力都很大。目前由于缺乏对钩藤叶进行系统的药学和药理毒理学研究,使其一直没有被开发利用,大量的钩藤叶资源一直处于废弃状态。而在钩藤属药用植物及近缘种中,大叶钩藤叶的重量和产量最大。目前有关大叶钩藤叶的药理作用尚未见报’.遁。研究目的对大叶钩藤进行资源调查,进行大叶钩藤叶生药学研究和主要化学成分测定,并在此基础上,对大叶钩藤药理作用进行初步研究,主要观察其对中枢神

3、经的影响和抗药物依赖的作用,为该药的进一步开发利用提供实验依据。实验方法.大叶钩藤主要分布于华南及西南地区。应用植物分类学与植物地理学方法,就近选点,在粤西地区进行大叶钩藤资源丰度,利用状况及生态环境等方面的调查,并采集制作腊叶标本。中文摘要.生药学鉴定方法:采集大叶钩藤药材标本,对钩藤叶进行性状鉴别,显微鉴别采用石蜡切片法观察叶片主脉及叶肉组织结构、采用水合氯醛透化法观察叶片粉末特征、采用表面撕片法观察叶面气孔及表皮细胞形态,理化鉴别采用生物碱沉淀反应及硅胶薄层层析色谱法对大叶钩藤中生物碱进行比较。.主要化学成分测定:采用法测定大叶钩藤不同部位有效成分钩藤碱、异柱.,

4、;甲醇一水钩藤碱含量,色谱柱为含.%三乙胺,冰乙酸调.:为流动相,流速.?一,进样量为.肛,检测波长为,柱温为室温。、大叶钩藤对中枢神经系统的影响.小鼠自发活动实验昆明种小鼠只,雌雄各半,禁食,饮水不限。将小鼠随机分为组,即空白对照组等容量生理盐水组,阳性药组地西泮/,钩组即大叶钩藤带钩茎枝,下同组/和大叶钩藤叶低/、中/、高/三剂量组,每组只动物。将各组小鼠放入.多功能小动物自主活动记录仪中,适应后,测定小鼠给药前的自主活动次数,记录时间为。记录时室内保持安静。然后按剂量给各组小鼠灌胃给药。分别于给药后、、各测定次自发活动数,记录内各组小鼠的活动数。.戊巴比妥钠阈下睡

5、眠剂量诱导小鼠入睡试验取昆明种小鼠只,雌雄大致各半。将小鼠随机分为组,即空白对照组等容量生理盐水组,阳性药组地西泮/,钩组即大叶钩藤带钩茎枝,下同组/和大叶钩藤叶低/、高/剂量组,每组只动物。按各组剂量给小鼠给药,药后后给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥钠/,以小鼠翻正反射消失以上为入睡标准,记录内各组小鼠的入睡个数。.戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间试验取昆明种小鼠只,雌雄各半,分组同上,每组只动物。按各组剂量给小鼠给药,药后后给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥钠/,然后记录各组小鼠的睡眠时间以给药后小鼠翻Ⅱ硕士学位论文正反射消失为入睡时间,翻正反射消失至恢复为睡眠时间。.硫酸士的宁

6、致小鼠惊厥试验:取昆明种小鼠只,雌雄大致各半,分组同上,每组只动物。按各组剂量给小鼠给药,给药后,腹腔注射硫酸士的宁/,记录注射士的宁后内惊厥小鼠数和死亡小鼠数,惊厥反应以小鼠出现四肢阵挛或强直性惊厥为指标。.大叶钩藤对小鼠苯丙胺依赖位置偏爱效应及脑内单胺递质的影响取经过自然位置偏爱测定合格的级昆明小鼠,按随机分组原则分为①空白对照组,②苯丙胺模型组,③模型组大叶钩藤带钩茎枝组/,④模型组大叶钩藤叶高剂量组/,⑤模型组大叶钩藤叶低剂量组/,⑥大叶钩藤纯钩簦/,每组只,雌雄各半。②~⑤组偶数天上午:腹腔注射苯丙胺?叫,奇数天上午:腹腔注射等体积生理盐水,⑥组按相应剂量灌胃

7、给予大叶钩藤钩提取物;③⑤组于每日下午:即给苯丙胺后,分别按相应剂量灌胃给予大叶钩藤提取物;①组以同体积生理盐水替代苯丙胺给药,其它处理同②组。整个过程共持续,实验期间小鼠饮水进食自由。实验时将位置偏爱箱中间的隔板放下,上午注射生理盐水、苯丙胺及灌胃给予钩藤碱后立即将小鼠置于白箱,上午注射及灌胃给予生理盐水后立即将小鼠置于黑箱,放置时间均为。以后的均按上述方法操作,共。在上午:耳最后一次给予苯丙胺后进行位置偏爱检测,通过动物行为学分析系统记录并分析小鼠内在白箱中停留的时问。完成测定后,立即将各组小鼠麻醉后快速断头处死,迅速剥取全脑,置液氮

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