cho dg44稳定细胞株无血清培养基的研发与优化

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2、厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文，并向主管部门或其指定机构送交学位论文(包括纸质版和电子版)，允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于：()1．经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文，于年月日解密，解密后适用上述授权。，(V／)2．不保密，适用上述授权。(请在以上相应括号内打“√”或

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4、目的产物的分离纯化等问题，而商业化无血清培养基价格相对昂贵，且配方保密，不利于后续的培养工艺优化。因此，自主研发可支持细胞高密度生长与高表达量的无血清培养基，并进行相应的工艺优化与反应器放大，以满足大量表达单克隆抗体的需求，对于抗体药物的产业化来说至关重要。本研究从CH0细胞培养基库中，快速筛选得到支持cH0DG44宿主细胞正常生长与转染的无血清基础培养基BM。在BM基础上，针对稳定表达E6F6嵌合抗体的CH0DG44．10G11细胞株，通过硫酸葡聚糖、酵母水解物、柠檬酸铁及起始葡萄糖与氨代谢相关氨基酸浓度

5、的调整，获得其个性化无血清培养基0pti—BM，可支持该细胞株批次培养密度超过7．0x106cells／mL，表达量超过70m∥L。研发得到相应的流加培养基FM与FMplus，两者结合使用可使CHODG44．10G1l细胞株流加培养密度超过1．2×107cells／mL，培养时间延长至15天，抗体表达量超过150m∥L。最后，在B10STAT@B．DCUII2L多联生物反应器上进行通气与搅拌方面工艺的初步摸索，在反应器上得到与摇瓶中一致的培养效果，实现了从摇瓶到反应器的工艺放大。本研究成功研发了针对cHOD

6、G44．10Gll细胞株的无血清培养基，并开展了相应的细胞培养工艺优化、放大工作，初步建立了无血清培养基筛选与优化平台，为其他稳定细胞株无血清培养基的研发和优化积累经验，同时也为哺乳动物细胞大规模培养工艺的研发奠定基础。关键词：cH0细胞：无血清培养基：工艺优化Abs打actAbstractRecentlymonoclonalantibodytherapeuticshasenteredarapiddeVelopmemperiod，anditsmarketpotentialisextremelyhuge．Bu

7、tinourcountrylarge-scalem姗maliancellculturemanufacturehaSbecomethecurdleofantibodydmgindustrializationw11ichi11cludescellculnIremedium，ceUcultureprocessopdmizationandbioreactorscaling．uptecllIl0109y．Duetobatch—to_batchV撕ations，potentialriskofcontaminations

8、，falseoperationsmproductss印arationa11dpurificationintraditionalmediacontaillingserum，meanwllilethecommercialselllm—f．reemediuInisexpeIlsiVeaIldrelatedcornponemsarek印tsecret，itisnecessaryforustodeVelophomemade