fgf87在人和小鼠牙齿中亚型分析及其对牙齿发育的影响

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1、福建师范大学硕士学位论文FGF87在人和小鼠牙齿中亚型分析及其对牙齿发育的影响姓名：葛玉强申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：张彦定201106摘要中文摘要哺乳动物的牙齿在发育的过程中，受到四大家族信号分子的调控。这四大家族包括：骨形成蛋白(BMP)、成纤维细胞生长因子(FGF)、刺猬蛋白家族(Hhs)和Wnt信号系统。FGF8是FGF信号通路中重要的一员。已有研究发现FGF8在人体中有四种亚型，分别是FGF8a、FGF8b、FGF8e和FGF8fi在小鼠中有八种亚型分别是FGF8a-h。人牙胚从牙板期到分化期F

2、GF8都有强烈的表达，而小鼠磨牙牙胚在E12时FGF8表达很强烈，E13时表达开始下降，到了E14时不再表达。在人和小鼠的牙齿发育中，FGF8表达哪种亚型，其在人和小鼠牙齿发育中表达模式的不同对牙齿发育有什么影响，为了解决这些问题，进行了本实验。通过RT-PCR和测序比对分析，发现在人和小鼠牙齿的发育中都表达FGF8a亚型，两者表达的FGF8亚型一致。为了研究其对牙齿发育的影响，构建了pNL．承ES2坷@P二只强猕慢病毒载体。通过磷酸钙三质粒共转染293T细胞法生产慢病毒。通过FGF8a慢病毒感染小鼠E13．5磨牙间充质

3、细胞来研究其作用。研究发现，感染了FGF8a慢病毒的牙胚，肾囊膜下移植8天后，牙齿发育到钟状期，与正常情况下发育到分泌期相比，牙齿发育被推迟。感染了FGF8a慢病毒的牙胚，肾囊膜下移植14天后，牙齿发育同样到了分泌期。但是牙齿结构上分析发现对照组的牙釉质相对较厚，实验组的牙釉质相对较薄；对照组的成釉细胞出现了退化现象，牙齿发育完全，而试验组的成釉细胞排列整齐，没有出现退化现象，牙齿发育被推迟。所以过表达FGF8a到了14天时候，FGF8a同样起到抑制牙齿发育的作用。关键词：FGF8，亚型，慢病毒，牙齿发育Abstract

4、4IIIIrlIIIIIrll[1llllllllllIIIllllllllY1998384Thereatefoursignalmolecularfamiliestoregulatetoothdevelopment，including：bonemorphogeneticprotein(BMP)，fibroblastgrowthfactor(FGF)，hedgehogproteinfamily(HhS)andWntsignaling．FGF8isanimportantoneoftheFGFfamily．Stusieshav

5、efoundthattherearefourisoformsinthehumanbody，named：FGF8a,FGF8b，FGF8eandFGF8f；andtherearceightisoformsinthemousebody,named：FGF8a·h．FGF8isexpressedstronglyfromlaminastagetosecretingstageinthemolartoothdevelopment，butintheEl2daysofmolartoothdevelopmetofmouse，FGF8iss

6、tronglyexpressed，theexpressionbegantodecreasetillE13，andthereisnoexpressioninthedayofE14．Butwhichisoformisexpressedhavenotbeenknowyetinthetoothdevelopmentofhumanandmouseandwhataretheeffectsontoothdevelopmentofthedifferentexpressionpatterns，toaddresstheseissues，co

7、nductedtheexperiment．ByRT-PCR,sequencing,comparativeanalysisfoundthat，inbothhumanandmousetoothdevelopmentFGF8aisoformisexpressed．Inordertostudytheimpactontoothdevelopment，constructedthelentiviralvectorofpNL-IRES2-EGFP-FGF8a．Threeplasmidsandcalciumphosphatewerecot

8、ransfectedin293Tcellstoproducelentivirus．AccordingtoinfectionofFGF8alentivirustoEl3．5molarmesenchymalcellstostudyitsrole．Theresultshowedthatthetoothwhichinfect