应用荧光分析法检测酶的研究进展-semanticscholar

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1、生物工程学报ChinJBiotech2009,December25;25(12):1765-1769journals.im.ac.cnChineseJournalofBiotechnologyISSN1000-3061cjb@im.ac.cn©2009InstituteofMicrobiology,CAS&CSM,Allrightsreserved综述应用荧光分析法检测酶的研究进展邢艳珑,毛相朝,王舒,王华磊,魏东芝中国科学院青岛生物能源与过程研究所,青岛266101摘要:酶是细胞新陈代谢的基础,酶的检测在生物技术、疾病诊断及药物开发等领域都具有十分重要的意义。在

2、检测酶的诸多方法中,荧光法因其灵敏度高、检测限低等优势发展迅速。以下简述了近年来荧光法在酶检测领域的研究,根据检测方法的不同分为直接荧光检测法和间接荧光检测法,其中直接检测法又根据不同的底物标记及检测机理进行分类。以下介绍了各种方法的应用,并展望了此类方法的前景和发展趋势,为酶工程及生命科学其他领域的相关研究提供信息。关键词:荧光探针,酶,检测RecentadvancesinenzymeassaysusingfluoremetryYanlongXing,XiangzhaoMao,ShuWang,HualeiWang,andDongzhiWeiQingdaoInst

3、ituteofBioenergyandBioprocessTechnology,ChineseAcademyofScience,Qingdao266101,ChinaAbstract:Enzymesplaysuchapivotalroleincellularmetabolismthatenzymeassaysareimportantforbio-engineering,diseasediagnosesanddrugdiscovery.Amongthereportedmethods,fluoremetryhasattractedmoreandmoreattentio

4、nduetoitshighsensitivityandpossibilityofcontinuousdynamicmonitoring.Therecentprogressesandapplicationsinenzymeassaysusingfluorescentprobeswerereviewed.Differentmethodswereclassifiedintodirectfluorescencedetectionandindirectfluorescencedetectionaccordingtotheirlabeledsubstratesanddetec

5、tionmechanisms.Ourwritingpurposeistoprovidethereaderswithaflavorofthekindsoftoolsandstrategiesavailableinenzymeassayswithfluorescentprobes.Also,theresearchsituationandprospectswerediscussed.Keywords:fluorescentprobes,enzyme,detection[2]酶与生物体新陈代谢的各种化学反应紧密相关,的工具。已报道的检测酶活的方法包括同位素标[3][4][

6、5-7][8-10]研究其性质及作用机理对于从分子水平研究生命现记法、电化学法、分光光度法、荧光法象具有重要意义。而且随着生物学与化学交叉学科等,其中分光光度法和荧光法是最大的一类检测方的发展,酶作为高效生物催化剂越来越受到关注,法。当在成分复杂的反应体系中,酶活较低时,就可[1][11]酶工程已在生物技术领域占有重要地位。酶活检以充分利用荧光法高度灵敏的优势。而且由于荧测是对酶功能的检测,可使酶催化化学转化的功能光法操作简便需样量少,在酶的高通量筛选方面也“可视化”,是发现新酶和对酶进行表征不可或缺有重要应用。以下综述了不同荧光分析法用于检测Received:O

7、ctober8,2009;Accepted:October22,2009Supportedby:NationalBasicResearchProgramofChina(973Program)(No.2009CB724703).Correspondingauthor:DongzhiWei.Tel:+86-532-80662681;Fax:+86-532-80662683;E-mail:weidz@qibebt.ac.cn国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2009CB724703)资助。1766ISSN1000-3061CN11-1998/QChinJBi

8、otech

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