转基因植物教学ppt课件

《转基因植物教学ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第四组主讲：刘潇资料搜索：常芳、孟淑丹、朱世杰整理材料成员：李瑞敏、宋焕芳制作ppt成员：朱世杰、原飞、王志鹏组长：常芳1转基转基因植物刘潇2章节目的什么是转基因植物？转基因植物是怎样得到的？如何鉴定转基因植物？培育转基因植物的目的是什么？转基因植物的安全性问题有哪些？4第一节转基因植物转基因植物:是利用基因工程(DNA重组技术)技术，把从动物、植物或微生物中分离到目的基因或特定的DNA片段，加上适合的调控元件通过各种方法转移到植物的基因组中，使得该基因或DNA序列能稳定表达和遗传的植物。转基因植物。通过植物基因工程获得

2、转基因植物在农业生产发展及植物分子生物学研究中有十分重要的意义，已获得的有重大经济价值的转基因植物已经很多。基因工程：就是重组DNA技术，指在体外将不同来源的DNA进行剪切和重组，形成杂合DNA或成嵌合DNA分子，然后将其导入特定的宿主细胞从而得到大量扩增和表达，使宿主细胞获得新的遗传特性，产生新的基因产物。技术路线目的基因分离植物表达载体的构建受体材料的准备遗传转化转化组织组织脱分化转化植株筛选炼苗目的基因本章不作详细介绍1.受体受体材料的选择：（选择标准）叶盘原生质体悬浮细胞愈伤组织胚状体活体胚轴、茎尖、茎段等2.载

3、体载体：是目的基因的运输工具，它能将分离克隆到的目的基因导入植物细胞并使其整合到寄主染色体组中得以表达。载体种类：（1）目的基因克隆载体：目的基因克隆载体与微生物基因工程类同，通常是由多拷贝的E.coli小质粒为载体，其功能是保存和克隆目的基因。（2）中间克隆载体：中间克隆载体是由大肠杆菌质粒插入T－DNA片段及目的基因、标记基因等构建而成。它是构建中间表达载体的基础质粒。（3）中间表达载体：中间表达载体是含有植物特异启动子的中间载体，其功能是作为构建转化载体的质粒。（4）卸甲载体：卸甲载体是解除武装的Ti质粒或Ri质粒

4、，其功能是作为构建转化载体的受体质粒。（5）植物基因转化载体：植物基因转化载体是最后用于目的基因导入植物细胞的载体，故亦称工程载体。它是由中间表达载体和卸甲载体构建而成。根据它的结构特点又可分为两种转化载体，即一元载体系统和双元载体系统。3.转基因方法概括起来说主要有两类：第一类是外源目的DNA的直接转化。第二类是以载体为媒介的遗传转化，也称为间接转移系统法。（1）直接导入法可以采用物理或化学方法直接将外源目的基因导入植物细胞。物理方法包括化学刺激法、电击法、显微注射法、基因枪法、微激光束法、花粉通道法等。化学方法包括P

5、EG法、脂质体介导法等。目的基因导入方法（重点）（1）直接导入法：A、基因枪法（附件）B、电击法C、花粉管通道法（备注：课本上将它单独分类）D、PEG介导基因转化法优点：1.不受受体种类的限制，特别适合根癌农杆菌不能侵染的植物；2.简化了质粒构建，可以用两个或两个以上的质粒进行共转化，而不需构建一个复杂的质粒；3.快速简便，转化率较高。缺点：但进去的DNA片段整合效率极低不易获得再生的植株，可能发生共抑制现象。载体介导法具体方法有农杆菌介导法、病毒介导法。农杆菌介导可采用“共培养法”，有根癌农杆菌和发根农杆菌两种载体系统

6、。以野生型根癌农杆菌载体系统为例：野生型根癌农杆菌Ti质粒大小约200—800kb，其中T-DNA区为12—24kb，vir区有35kb，T-DNA上有tms、tmr和tmt三套基因，分别编码合成植物生长素、分裂素和生物碱的酶。在T-DNA两端各有一个25bp的末端重复序列LB和RB，在T-DNA的切除及整合过程中起着重要作用。T-DNA区可高效整合到植物受体细胞的染色体上并得到表达。利用这一特点，将目的基因转入Ti质粒的T-DNA区构建根瘤农杆菌的转化载体。根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)

7、,是一种革兰氏阴性土壤杆菌,它含有Ti质粒,能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤,即诱发冠瘿瘤.Ti质粒(包括Ri质粒)上有一段转移DNA,在农杆菌侵染宿主植物时,这段DNA可以转移进植物细胞,并稳定地保留在植物细胞染色体中,变为植物细胞新增加的一群基因,最终能通过有性世代遗传给子代。（2）Vir区（virulenceregion）：该区段上的基因能激活T-DNA转移，使农杆菌表现出毒性，故称之为毒性区。T-DNA区与Vir区在质粒DNA上彼此相邻，合起来约占Ti质粒DNA的三分之一。Ti质粒的基因位点及其功能区域（1）T－D

8、NA区（transferred-DNAregions）：T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA，故称之为转移DNA。该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。1.植物细胞转化的共整合系统T-DNA克隆在大肠杆菌质粒上，含有E.coli的选择标记和植物选择标记Kmr。首先在E.co