超声造影定量评价早期实验性糖尿病肾血流灌注改变实验研究

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1、第三军医大学硕士学位论文超声造影定量评价早期实验性糖尿病肾血流灌注改变实验研究姓名：何芬申请学位级别：硕士专业：影像医学与核医学指导教师：卓忠雄201205第三军医大学硕士学位论文超声造影定量评价糖尿病肾血流灌注早期改变动物实验研究摘要背景：糖尿病肾病是导致终末期肾病的主要原因之一，并且逐年呈上升趋势。目前，临床诊断糖尿病肾病主要指标是尿微量白蛋白，确诊时肾损害已经进入不可逆阶段。在尿微量白蛋白出现前，肾脏已出现病理形态和血流灌注改变，应用一种安全、简便、有效的检查技术反映这些变化有一定的临床意义。超声造影定量评价肾血

2、流是近年发展起来的影像学新技术，超声造影剂安全无肾毒性，造影剂微泡大小接近红细胞，被视为红细胞示踪剂，使这一技术评价血流灌注有显著优势。目前，针对这一技术进行了大量方法学研究和在临床运用的基础研究。文献报道中应用的两种主要的给药方法是团注法和连续注射一再灌注法，均认为各自方法能准确定量评估肾血流灌注。超声造影评价急性肾功能衰竭的实验研究和慢性肾功能减退的临床研究也证实了这一技术的可行性，但报道的有效参数不一致，同时针对糖尿病肾血流灌注早期改变的研究较少。目的：1．比较团注法和再灌注法超声造影的准确性和实用性。2．探索超

3、声造影定量评价大鼠糖尿病肾微循环灌注早期改变的有效性，研究主要用于定量评价的主要时间一强度参数。材料和方法：1．主要实验材料实验仪器：美国通用电器公司LOGIQ9彩色多普勒超声诊断仪，10L变频线阵探头，配有具有编码脉冲反向谐波技术的低机械指数造影模式，内置定量分析软件。超声造影剂：采用意大利Bracco公司SonoVue@。对氨基马尿酸：分析纯，日本TIC公司产品。链脲佐菌素：白色粉剂，美国Sigma公司产品。实验动物：新西兰大白兔20只，雄性，体质量2．0～2．5kg，平均2．2kg；SpragueDwley大鼠5

4、0只，6月龄，体质量252±12kg。以上均由第三军医6第三军医大学硕士学位论文大学附属新桥医院实验动物中心提供。2．实验方法(1)团注法和再灌注法超声造影：以剂量0．5、2．0、5．0lag．k91．min‘1的多巴胺持续滴注改变肾血流量，每次多巴胺滴注后，进行团注一实时低机械指数谐波超声造影和连续注射一再灌注实时低机械指数谐波超声造影，同时收集血、尿标本测对氨基马尿酸清除率以此作为肾血浆流量的金标准。造影后分析原始时间一强度曲线得到绝对达峰强度A、达峰时间TTP，拟合曲线得曲线上升支斜率Upslope，统计分析行各

5、参数给药前后配对样本T检验，并分析各参数与肾血浆流量的相关性。(2)超声造影定量分析大鼠糖尿病肾微循环灌注早期改变：链脲佐菌素腹腔注射诱导大鼠I型糖尿病模型，大鼠被分为对照组、糖尿病组、未成模组，在给药前及给药后第11、30、46、61天用团注法行超声造影，同时检测尿白蛋白分泌率，。肾组织病理切片HE、PAS染色观察肾小球病变程度，分析原始时间一强度曲线得到皮、髓质绝对达峰强A、达峰时间TTP，二者比值为曲线上升支斜率Upslope，皮、髓值参数比Ratio—A、Ratio—TTP。三组间各参数单因素方差分析，差异是否

6、具有统计意义。结果：1．团注法和再灌注法超声造影图像结果：团注后按段动脉一叶间动脉一弓形动脉一皮质一髓质顺序显影，最大增强后开始反方向消退。再灌注增强顺序与此相似，达到最大增强后保持增强状态。团注法时皮质时间一强度曲线上升支近似直线，再灌注曲线为斜行上升到达一定强度后出现转折，再缓慢上升至最大增强状态。2．团注法和再灌注法超声造影统计分析结果：随着多巴胺剂量的改变，肾有效血浆流量和绝对达峰强度A、达峰时间TTP表现出有统计意义的变化。团注时，A与。肾有效血浆流量的相关性为0．85，P=0．00，再灌注时，二者相关性为0

7、．66，P=0．00；团注时，TTP与肾有效血浆流量相关性为一0．92，P--0．00，再灌注时，二者相关性为一0．72，P=0．00：团注时，Upslope与肾有效血浆流量相关性不显著，P=0．86，再灌注时二者相关性为0．77，P=0．00。3．糖尿病大鼠尿白蛋白分泌率和病理结果：糖尿病大鼠模型成立后，大鼠24h尿白蛋白呈上升趋势，第60天时与另两组比较有统计意义。第1l天和30天时，光镜下病理观察，糖尿病大鼠肾小球肥大，血管球扩张：第46天、61天时，糖尿病大鼠肾系膜基质增宽，基底膜增厚。4．超声造影定量分析大鼠

8、糖尿病。肾微循环灌注结果：时间一强度曲线参数A、TTP在各组间差异无统计意义；糖尿病组皮质Upslope在第1l、30、61天时较对照组延长，7第三军医大学硕士学位论文差异有统计意义，髓质Upslope在第30、61天时，较对照组延长，差异有统计意义；对照组和未成模组Ratio—A大于1，第11、46、61天时，糖尿病组Ratio