干扰素-γ对膀胱癌细胞株增殖的影响及分子机制研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文干扰素--γ对膀胱癌细胞株增殖的影响及分子机制研究姓名：徐斌申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：吴小候201205重庆医科大学硕士研究生学位论文干扰素1对膀胱癌细胞株增殖影响及分子机制研究摘要第一部分：病人血清中IFN-1，与膀胱癌组织中hepaCAM的表达及相关性分析目的：研究膀胱癌患者血清中干扰素吖(interferon．gamma，IFN吖)表达和膀胱移行上皮细胞癌中肝细胞黏附分子(hepatocytecelladhesionmolecule，hepaCAM)蛋白表达及其相关性分析和与临床病理各组参数间的关系

2、。方法：应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)检例33例膀胱癌患者病人及15例健康志愿者血清中IFN一丫的表达量和应用石蜡包埋免疫组织化学法(paraffinwaximmunohistochemistry，PIH)检测33例膀胱移行上皮细胞癌及26例癌旁组织中hepaCAM蛋白的表达并明确hepaCAM蛋白表达定位。结果：ELISA结果显示膀胱癌患者血清中IFN—Y的表达量显著低于健康志愿者(P

3、白显著低于癌旁组织(P<0．01)，hepaCAM蛋白表达的缺失与膀胱移行上皮细胞癌各项临床病理参数间均无差异(P>O．05)，hepaCAM蛋白表达主要定位于细胞膜及细胞核，胞浆中基本不表达。IFN一丫在膀胱癌患者血清中表达降低与hepaCAM蛋白在膀胱癌组织中的表达缺失呈正相关(r=0．899，P

4、细胞癌第二部分：IFN一1，抑制膀胱癌细胞株增殖及分子机制研究目的：探讨干扰素．Y对膀胱癌细胞株T24及BIU．87增殖影响及其分子机制。方法：五种不同终浓度(125U／ml，250U／ml，500U／ml，1000U／ml，2000U／m1)重组人细胞因子IFN一1，处理人膀胱癌T24及BIU一87细胞，分别在24h，48h，72h采用MTT(3-(4，5-Dimethylthiazol-2一y1)．2，5．diphenyltetrazoliumbromide)法检测T24及BIU．87增殖抑制率(inhibitionratio，IR)；以

5、作用浓度为500U／mlIFN一1，作用T24及BIU一87细胞，并设为实验组，未经IFN-丫处理设为空白对照组。流式细胞仪检测(flowcytometry，FCM)T24及BIU一87细胞周期各阶段变化；RT-PCR检测hepaCAM基因表达；Westemblot检测hepaCAM及p21附1蛋白表达。以肿瘤坏死因子．0【(tumornecrosisfactor-alpha，TNF一0【)作为IFN．7对照组，经500U／ml重组人细胞因子TNF—Q分别作用T24及BIU一87细胞，RT-PCR检测hepaCAM基因表达，WB检测hepaC

6、AM蛋白表达。结果：IFN．7抑制T24及BIU-87细胞增殖呈时间剂量依赖性4(P

7、aCAM在IFN一丫对膀胱癌细胞株T24及BIU．87增殖调节中可能起作用，并可能通过上调p21wAH蛋白表达阻滞T24及BIU．87细胞于Go／Gl期，而抑制T24及BIU一87增殖。关键词：膀胱癌，干扰素一丫，hepaCAM，p21wⅢ，增殖霉庆医科大学硕士研究生学位论文EFFECTSOFPROLIFERATIoNoFBLADDERCANCERCELLSUNDERTHESTIMULATIONOFINTERFERON-丫ANDEXPLORETHEMOLECULARMECHANISMABSRACTPARTONEThelevelofIFN-丫i

8、nserumofpatientssufferedfromTCCBandtheexpressionofhepaCAMproteininTCCBandthecorrel