nedd9分子在肝癌细胞增殖迁移中的作用研究

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1、THERoLEOFNEDD9INHUN删眦PATOMACELLPROLIFERATIONANDMIGRATIONADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByWenxueQiaoSupervisor：Prof．HaiyingJin，ShaopingJiMay，2014独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的

2、研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者鹤：卉厶学吼保护知识产权声明本人完全遵守河南大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属河南大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为河南大学。学校可以公布论文的全部或部分内容(含电子版，保密内容除

3、外)，可以采用影印，缩印或其他复制手段保存论文。学校有权允许论文被查阅和借阅，并在校园网上提供论文内容的浏览和下载服务。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》和编入《中国知识资源总库》，同意按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。⋯⋯柔蚶翩塞名：弼侈喻英文缩写a．aAmprbpDEPCDMSODNADNTPEBE．coliE叽AFBSHCCI阿GkDLBMRNAODPCRPBSRNAirpmRTRT．PCRshRNASDSTEMEDTACETAI英文全称Aminoacid缩略词表中文全称氨基酸Ampicilinresist

4、ant氨苄青霉素抗性Basepair碱基对Diethylpymcarbonate焦碳酸二乙酯Dimethylsulfoxide二甲基亚砜Deoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸Deoxynucleosidetriphosphate三磷酸脱氧核苷Ethidiumbromide溴化乙锭Escherichiacoli大肠杆菌Ethylenediaminetetra-aceticacid乙二胺四乙酸fetalbovineseTum胎牛血清Hepatocellularcacinoma肝细胞肝癌Isopropylthio⋯13Dgalactoside异丙基硫代⋯

5、13D半乳糖苷Kilodalton千道尔顿Luria。BertanimediumLB培养基messengerRNA信使RNA00ucaldensity光密度Polymerasechainreaction聚合酶链式反应Phosphate。bufferdsaline磷酸盐缓冲溶液RNAinterferenceRNA干扰Revolutionsperminute每分钟转数ReverseTranscription反转录reversetranscriptionpolymerase逆转录聚合酶链式反应chainreactionSmallhairpinRNA小发卡状RNAsod

6、iumdodecylsulfate十二烷基磺酸钠N，N，N’，N'-tetramethylethylenediamineN，N，N’，N’．四甲基二乙胺transhepaticarterialchemo-经肝动脉化疗栓塞术Embolizationtranshepaticarterialinfusion经肝动脉灌注化疗术摘要研究背景：原发性肝癌是一种全球高发、恶性程度很高、易转移复发的恶性肿瘤。复发和转移是造成大部分肝癌患者死亡的原因。目前仍无特效的诊断与治疗肝癌的手段。究其原因在于对肝癌的发生与发展机制的认识不足。与其它肿瘤相似，肝癌的发生与发展的分子机制十分复

7、杂，除了可能的外部因素外，内部基因的表达与调控对其发生起着决定性作用。除了基因本身的突变，一系列调控因素诸如表观遗传学调节也能影响到目的基因的表达。NEDD9是一个与发育相关的基因，在细胞的增殖与发育中起着重要作用。但是具体作用机制目前不明，尤其是在原发性肝癌中的作用亟需研究。研究目的：在肝癌细胞系SMMC一7721细胞中利用过表达NEDD9、合成shRNA抑制NEDD9的表达，使之形成NEDD9的过表达和低表达的表型，观察转染后的肝癌细胞系SMMC一7721细胞体外迁移和增殖能力的变化。利用E．coli表达NEDD9与GST的融合表达蛋白，以体外的pull—d

8、own试验，获取与NED