【5A版】肌酸激酶.ppt

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1、肌酸激酶及其临床意义郑大五附院重症医学科石宗华什么是肌酸激酶（CK）？CK升高有什么意义？CK有几种同工酶？CK家族成员有哪些？CK-MB升高-----心肌梗死？CK-MB不升高-----排除心肌梗死？CK-MB能高于CK么？有哪些因素能导致CK升高？？？肌酸激酶肌酸激酶(CK)，旧称磷酸肌酸激酶，参与能量代谢，分子量81000，两个亚基组成ADP+磷酸肌酸CKATP+肌酸CK在人群中不是正态分布，正常人CK变动与人种、性别、年龄、肌块大小、体力活动等有关。安静时血清CK总活性：男：10-100U/L，女：10-60U/L临床上测定的血清CK指的是CK

2、的总活性熬夜、过劳、剧烈运动、某些药物(如秋水仙碱)也会使肌酸激酶增高运动后人体血清CK活性升高：一是运动使肌细胞膜通透性升高；二是运动导致肌细胞损伤血清中CK升高一般提示含CK的细胞通透性增高或细胞的破坏CK家族成员分布及比例CK分布于骨骼肌、心肌、脑、胃肠平滑肌、甲状腺、肺组织中。以骨骼肌含量最高，其次为心肌，再其次为脑和胃肠平滑肌CK有四种同功酶形式：肌型(CK-MM)、脑型(CK-BB)、杂化型(CK-MB)和线粒体型(CK-MtMt)。CK-MM型主要存在于各种肌肉细胞中，CK-BB型主要存在于脑细胞中，CK-MB型主要存在于心肌细胞中，CK

3、-MtMt型主要存在于横纹肌线粒体中CK主要存于胞浆中，少量存在于线粒体、微粒体中正常情况下，CK极少透出细胞膜，细胞外液中CK浓度仅是细胞内液的1/10000-1/1000CK亚基CK同工酶主要组织部位MMM骨骼肌、平滑肌BMBBB心肌脑MtMtMt肝脏、横纹肌线粒体中CK及其同工酶的分布表临床上，CK家族除了CK-MM、CK-BB、CK-MB、CK-MtMt外，还存在巨CK1(M-CK1)、巨CK2(CK-mt)巨CK1(M-CK1)：巨分子酶，多为CK-BB与IgG或IgA的复合物，少数为CK-MM与IgG或IgA的复合物巨CK2(M-CK2或C

4、K-mt):存在于线粒体膜上，线粒体崩解时随碎片进入血液，呈低聚状态M-CK1不被抗CK-M抗体抑制，活性被100%测出。故在测CK-MB活性时，测得的CK-MB活性假性增高M-CK2绝大多数不影响CK总活力升高常见CK家族成员分布及比例列表小肠201.12.78子宫前列腺5-162-2064-9334-392-659-60甲状腺4-260-173-96CK同工酶检测方法包括1.酶活性法：免疫抑制、电泳、离子交换层析、放射免疫、化学荧光等；2.酶质量法：mass质量法等1.免疫抑制法:具有简单、快速、不需手工操等特点，临床多用。原理：正常人血清CK-B

5、B极少可忽略不计，应用单克隆抗体与CK中的M亚基结合，抑制CK-MM及CK-MB中的M亚基活性，通过速率法测定B亚基,结果乘以2即CK-MB活性免疫抑制法的原理是假定标本中无CK-BB活性。但在某些因素下CK-BB升高,必定影响CK-MB测定结果，甚至出现CK-MB＞CK此法所测值常高于其它方法：可能与CK-MM分为1、2、3亚型有关。一般抗MM血清对MM3抑制较好，但对MM1抑制较差。正常情况下血中MM亚型的存在以MMl为主，故导致正常值明显偏高。AMI第一天血中以MM3为主，但第二天以后则以MMl为主临床CK常用检测方法免疫抑制法检测CK-MB活性

6、原理图解注意，红细胞及许多组织中都含有腺苷酸激酶(AK)，催化下列反应：2ADPAKATP+AMP,也影响CK-MB的测定结果偏高，故测定CK活性尽量不用溶血标本AMP及五磷酸二腺苷（AP5A）能竞争性地抑制肌肉及红细胞中的AK，试剂中加入AMP及AP5A，能有效抑制AK的干扰,抑制率可达90%～95%NaF能抑制AK,但也能和CK激活剂Mg2+，逐渐形成MgF2沉淀，所以NaF与Mg2+分开配制，临时混合CK同工酶半衰期短，故酶活性的高低受标本采集时间的影响也较大2.琼脂糖凝胶电泳法：特点：准确可靠；缺点：灵敏性较差原理：在电泳条件下，CK-BB迁移

7、最快，CK-MB居中，其次CK-Ig的复合物（巨CK1型），CK-MM最慢电泳法血清CK同工酶正常值：CK-MB<5%；CK-MM>94%-96%；CK-BB无或极少量3.酶质量法-mass质量法：其原理是利用CK-MB抗原性，根据抗原抗体反应测CK-MB酶蛋白浓度，单位为μg/L。准确性高，但检测时间长4.酶质量法：近年来应用CK-MB单克隆技术制备出特异性极高的只和CK-MB作用的抗体血清。方法简单，特异性高，是目前重点发展的方法，国内应用不多酶质量法和免疫抑制法所测结果有时不一致：酶变性失活但仍保留抗原性，此时用测酶活性的方法结果会偏低临床中免疫

8、抑制法测定CK-MB，当CK-MB/CK超过30%时，如无溶血，须警惕巨CK1或CK-BB存在