中药肉豆蔻抗肿瘤活性部位筛选及体外抗肿瘤机制研究

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1、中药肉豆蔻抗肿瘤活性部位筛选及体外抗肿瘤机制研究学位论文完成日期：ⅥM0。Io指导教师签字：二萎五互匝答辩委员会成员签字：2递青岛科技大学研究生学位论文中药肉豆蔻抗肿瘤活性部位筛选及体外抗肿瘤机制研究摘要目前，肿瘤已经成为危害人类健康的重大疾病之一。由于发病率高、诊断困难、治疗手段有限及治疗效果差等因素，使恶性肿瘤的治疗成为了一个漫长的过程。外科手术治疗、放射治疗、化学药物治疗是恶性肿瘤的主要疗法。目前，化学药物治疗在三大疗法中占有重要的地位，但是其靶向性低、毒副作用大。中药来源广、价格低、毒副

2、作用小，从中药中提取有效成分，并在此基础上研制抗肿瘤的新药已经成为当前药物研究的热点。本文主要进行了肉豆蔻粗提物的筛选，分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、乙醇部位和水部位。以MTT法测定不同细胞株对不同部位的增殖抑制活性，并对肉豆蔻有效活性部位的抗肿瘤机制进行了研究。本文选取了人肺癌细胞A．549、人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞BEL一7402、人结肠癌细胞HCT-116和人结肠癌细胞系RKO五株癌细胞检测了活性部位的体外增殖抑制作用。MTT法结果显示，人肝癌细胞BEL．7402对乙酸乙酯部位显

3、示出较好的细胞增殖抑制作用，其IC50值为36．07}tg／mL。hoechst33258染色和基因组DNA检测发现，肉豆蔻的乙酸乙酯部位能够诱导人肝癌细胞BEL．7402凋亡。进一步研究发现，肉豆蔻的乙酸乙酯部位能引起BEL．7402细胞线粒体膜电位降低，诱导胞内ROS产生。Western印迹法检测发现，肉豆蔻的乙酸乙酯部位能促进BEL．7402细胞中细胞色素C从线粒体大量释放到胞质中，导致相关蛋白Bcl-2和Bax的表达，进而激活caspase．9／3，使细胞进入线粒体凋亡程序。综上所述，中

4、药肉豆蔻作为一种低毒、安全且低价的抗肿瘤活性物质，有潜力成为一种抗肝癌新药物。关键词：抗肿瘤；肉豆蔻；活性；筛选；机制SCREENINGANDANTI．TUMORACTIVITYOFNUTⅣ匝GANDTHEIRUNDERLYINGM匣CHANISMSINVITROABSTRACTPancreaticcanceriSoneofthemostcommonmalignanttumorsinhumanatpresent．Despitehighincidence，difficulttodiagnose，l

5、imitedtreatmentandpoortreatment，itremainsalongprocessinCancertreatment．Surgery，radiationtherapy，chemotherapyisthemaintreatmentofmalignanttumors．Currently，chemotherapyplaysinimportantroleinthethreetreatments．However，mostofchemotherapyagentspossessseri

6、oussideeffects．Muchattentionhasbeenpaidtofindnovelanticanceragentswithsourcesbroad，lOWprice，littlesideeffectsofChinesemedicine，asextractactiveingredientsfromChinesemedicineanddevelopmentofanti．cancernewdrugs．Crudeextractsofnutmegweredividedintofive．p

7、haseinthenovelasf0110wing1．Petroleumetherphase，2．Ethylacetatephase，3．Ethanolphases，4．Waterphases．Celllinesofdifferentphasesofthevalue．addedinhibitingactivityWasassessedbyMTTassay，andanti—tumormechanismofeffectiveactiveingredientfornutmegwerestudiedmS

8、experimentschoosesfivehumancancercells(humanlungcancercellA．549．humancervicalcancercellsHela,humanhepatomacellsBEL．7402．humancoloncancercellsHCT—l16andhumancoloncancercelllineRK01todetectedappreciationinhibitoryeffect．TheresultsofMTTassayshowedthatth