egcg通过抑制溶酶体途径增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性

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1、星g￡Q查鱼溘到查釜往王透昱渣堕体筮戆匝韭自堕筮戆鲍绳胞五圭⑧论文作者签名：盘生垄指导教师签名：论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：答辩委员会主席：夔玺渲数拯浙江太堂委员1：夔玺溘熬拯浙江太堂委员2：垂菌盈窒送浙江省医堂銎堂睦委员3：夏太登数援浙江太堂委员4：Author’ssignature：一o■oSupervisor7ssignature：Thesisreviewer：2．ZENGQun-li＼ProfessoflZheiiangUniversityCollegeofMedicine．FUJ

2、ian-yun＼ChiefPhysician＼ZheiiangProvincialCenterofDiseaseControlandPreventionExaminingCommitteeChairperson：ExaminingCommitteemember：．WANGYinkResearchFellowUZhejiangAcademyofMedicalSciences．Dateoforaldefence．．21／2／201412，j浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指

3、导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特另IJJjH以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：旃洳走签字慨伽Icl年?月<日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝鎏盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行

4、检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：旃幽穆导师签名：签字日期：伽fc}年；月6日签字日期：致谢致谢致谢，意味着即将向我的硕士研究生生涯说再见，回首这两年多的学习经历，心中感慨良多。回顾两年多以来的硕士学习和科研工作，我在学业、科研和生活上得到了众多老师、同学和朋友们的热心帮助和有力支持。在此，我要向他们表示我诚挚的谢意!首先，今日论文的完稿，多承蒙我导师朱心强教授的悉心指导，朱老师给我提供了良好的实验环境，同时在科研上给

5、了我大量的、极其有益的建议和具体的指导，并在论文的撰写和审稿中倾注了大量的心血。在此，我再次表示万分的感谢!其次，非常感谢郑一凡高级实验师和章军副教授以及余沛霖老师，还要特别感谢徐玉英老师，博士研究生段婷，硕士研究生沈婷、周凡、胡鹏、王婷婷、徐钦、李金和葛娟等兄弟姐妹一直以来给予的帮助和关怀，一起生活和工作学>--j的美好时光里，你们给予我的真诚的鼓励：和无私的帮助是终生难忘的。再次，感谢杨军教授、夏大静教授、朱永平教授平时对我的指导和帮助。最后，我要感谢父母、家人和朋友多年来在生活上无微不至的照顾和精神

6、上的支持。浙江大学硕士学位论文中文摘要EGCG通过抑制溶酶体途径增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性【研究目的】浙江大学医学院营养与食品卫生学硕士研究生许淑珍硕士生导师朱心强教授中文摘要医学上一般使用化疗和放疗医治子宫颈癌等恶性肿瘤。但是肿瘤化疗和放疗都有较大的毒副作用，所以利用毒性低的天然植物化学物作为肿瘤的预防和治疗一直是人们研究的方向。EGCG(epigallocathechin．3．gallate，表没食子儿茶素没食子酸酯)是茶多酚的主要成分。已有的体外研究发现EGCG能够诱导肿瘤细胞发生凋亡，具有潜在的

7、肿瘤预防和治疗的作用。我们实验室先前的研究发现EGCG在无血清培养条件下可以通过抑制细胞自噬，降低肿瘤细胞的生长活性。我们使用子宫颈癌HeLa细胞在正常培养条件下发现EGCG可以抑制自噬，还发现EGCG使溶酶体膜通透性改变并发生渗漏。溶酶体失活使自噬过程无法完成，导致细胞内自噬体显著增加囤积。有文献指出抑制自噬能增加传统化疗药物顺铂诱导的凋亡，是因为自噬使癌细胞对顺铂的耐药性增强。因此我们使用EGCG结合传统化疗药物顺铂，以便观察EGCG对顺铂诱发子宫颈癌HeLa细胞死亡的增敏效果。EGCG通过抑制自噬，

8、使顺铂更有效的发挥药效。与EGCG同时作用降低了顺铂的所需给药浓度却显著地增加了HeLa细胞对顺铂的敏感性。II浙江大学硕士学位论文中文摘要【研究方法】1．细胞培养：细胞分别在完全培养液中培养，随后加入EGCG、加或不加顺铂处理不同时间；2．Hoechst．PI双染检测细胞存活率：hoechst标记总细胞，PI标记死细胞，利用软件ImageJ计数细胞；3．Westernblotting实验：提取细胞总蛋白，检测不同蛋白在细胞内