拟南芥晚花突变体laf1的表型分析及基因鉴定

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1、AnalysisofPhenotypeandGeneIdentificationoftheArabidopsisLate—·floweringMutantlaflADissertationSubmiRedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceBy三iuJieSupervisor:Prof.MiaoChenDate:Jun,2014关于学位论文独立完戚和内容创新的声明拳人向河南太学援出硕士攀柱串请量

2、本人鄄重声明:所星交酌学位论文菱表人巷导师酌茸旨导下独立充成酌,对所研究妁课题甯新酌见解。据残研妻o.除变中特别加以说明、标穗和致谢妁地方外,论交中不包括菇他人已浆发袭或撰写过酌研究成果。也不包籍其他人为蕤得侮何数育、科研机构妁学桩或证书禹使用过妁材料。与藏一闲工作酌同事对本研究所馘酌任何贡献均已垂论麦串锋了鲷确妁说明并表示了谢意毒擘控串请人(学位论文砟聱)茎名:一鲎。2L..20,牟卑5月f皇国关于学位论文著作权使用授投书本人经河南太葶审核1}叱准授予颈士学位。作为学位论支酌作者,拳人毙金了解并同意坷南太孝商关保留、馕周学镶论文酌譬末,彗P河南失学翁糨向醋家

3、图书馆.科研搭忽机构、毂据收壤执构和皋铰图书镱筹提供葶悔佬建(纸腐戈末和电子文本)以供公众检索,萱溷·本人捩捉河南大学出于蜜鹈、琏宽学校学术发展和避行葶水变流等目酌。叮瞪采取影}I】,、缩印、扫描和谚爱等复制手段绦存、;E编孝佳论文《纸质文本和电子支皋)。(咎叠锿誊内客的学位论盘在解誊看连闱本援楗书)孝位薮稃者(学位论文作者)釜名:童I垒一一20协卑刍月/6臼孝位论支尊旨导激烀釜一擎落一一绎:O枣黛1‘缩略词Abbreviations英文缩写英文全称中文名称BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白cHAPs3-【(3-Ch。laInid。prop

4、yl)一抵thyl—amm删一1‘prop3.【(3一丙基胆酰胺)[甲基一铵基】.1一丙C24dDTTEDTAEMSGA3IPGmiRNALDPMSFPAGESDSSDTCATrisT6P2DanesulfonicacidColumbia24DayDithiothreitolEthyleneDiamineTetraaceticAcidEthylmethaneSulphonateGibberellinsA3ImmobilizedpHGradientmicroRNALongDayPhenylMethaneSulfonylFluoridePolyAcrylamide

5、GelElectrophoresis硫酸盐哥伦比亚24生态型天二硫苏糖醇乙二胺四乙酸乙酰甲基磺酸赤霉素pH渐变固态胶条微小RNA长日照苯甲基磺酰氟聚丙烯酰胺凝胶电泳SodinmDodecylSulfate十二烷基硫酸钠ShortDayTriChloroaceticAcidTrishydroxymethylaminomethansTrehalose··6·-Phosphate2Dimension短曰照三氯乙酸三羟甲基氨基甲烷6一磷酸海藻糖二维摘要开花是植物由营养生长向生殖生长转变的一个重要转折点,在正确的时间诱导起始成花是保证植物成功繁殖的关键。植物的开花受到精

6、确且错综复杂的网络调控,多种内源和外源信号能调控植物开花。目前研究表明春化作用、光周期、自主途径、赤霉素、糖类等都能调控植物的开花。前人研究发现一个C24背景的突变体/afl,此突变体开花延迟,莲座叶增多。通过统计分析发现,taft比野生型推迟开花14d左右、莲座叶数目多20片以上。为了确定lafl突变基因通过哪种途径影响开花调控,分别检测了突变体植株在不同开花调控途径中的表型:在4"C对种子分别春化处理3d、4周和8周,随着春化时间的延长,layl的莲座叶数目和花期与野生型的差距逐渐减小,但并未完全恢复晚花表型。这说明f卵对春化作用敏感。由此推测突变基因对花

7、期的影响不是在春化途径中发挥功能。为了确定lafl突变基因是否在光周期途径中调控花期,或者光周期能否恢复lafl的晚花表型,分别用8h光/16h暗的SD和16h光/8h暗的LD对野生型和突变体进行处理。随着光照时间的延长,lafl的莲座叶数目和花期与野生型的差距逐渐减小,但可以明显看出layl在LD/SD条件下仍具有晚花表型,由此可以说明突变基因并不在光周期途径中发挥作用。为了确定枷突变基因是否在赤霉素途径中调控花期,我们用GA3对用野生型和突变体进行喷施处理,施加GA3后野生型和突变体的花期均有少量提前,但赤霉素处理仍然不能将突变表型恢复。说明突变也不是发生

8、在赤霉素途径中。综上所述可以推测出la

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