赤皮青冈居群遗传多样性与遗传结构分析

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1、AnalysisonGeneticDiversityandGeneticStructureofCyclobalanopsisgilvaPopulationZHUPinhongAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofAgriculturelnSilviculturelnCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangsh

2、aHunan410004，RR．CHINASupervisorProfessorLIZhihuiMay,2014IIIIIIIIIIIIlUlIIIIIlY263101中南林业科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品，也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：

3、朱品组2DI牛年万月2了日中南林业科技大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于：1、／保密口，在年解密后适用本授权书。＼髟不保密口。(请您在以上相应方框打“√")。，)，1作者签名：朱品纽导师签每瘩耽％，．绕加lJ}年占月29日7刀。峥年r序j盼日摘要赤皮青冈(Cyclobalan

4、opsisgilva)属壳斗科青冈属常绿乔木，树干通直，材质坚硬，是优良的珍贵用材树种，具有重要的经济价值和生态效益，现已被列为国家II级保护植物。本文利用ISSR分子标记技术对来自湖南，浙江分布区内的7个居群共140个样本进行遗传多样性和遗传结构分析，研究居群内和居群间的遗传多样性水平，揭示不同地理分布区赤皮青冈居群的遗传关系，为赤皮青冈资源的有效保护、合理利用及遗传改良策略的制定提供理论依据，研究结果及方法如下：1、确立了适合于赤皮青冈的ISSR．PCR反应体系。通过单因素试验对影响赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的5个主要因素进行研究，初步确定

5、各个因素的最适浓度范围；再通过正交设计和直观分析对PCR扩增体系进行深度优化，最后得到一套赤皮青冈ISSR-PCR扩增的最佳反应体系：即在20I-tL反应总体系中，模板DNA为20ng，dNTPs浓度为0．2mmol／L，M92榷度为2．5mmol／L，引物浓度为0．2Ltmol／L，TaqDNA聚合酶为1．0U，并得到赤皮青冈ISSR-PCR反应最佳扩增程序。2、以优化好的反应体系为基础，从100条ISSR引物中筛选出13条多态性引物，对赤皮青冈7个居群共140个DNA样品进行遗传多样性研究。13个引物共检测到140个位点，其中多态位点111个，总

6、的多态位点百分率(P)为79．29％，各居群P值在61．42％75．00％之间，洞口居群最高，桑植居群最低。赤皮青冈居群总体水平上的Shannon信息指数(I)为0．4514，各居群I值在0．3234-4)．4193之间，Nei基因多样性指数(H)总体水平为0．3021，各居群H值在0．2164--0．2871之间，I值和H值都是靖州居群最高，桑植居群最低。以上遗传分析结果表明，赤皮青冈各居群内遗传多样性水平相对较低。3、赤皮青冈居群间的遗传分化较大，基因分化度(Gst)为0．0613，这表明，赤皮青冈的遗传变异大部分存在于居群内，居群内的遗传变异占

7、总变异量的93．87％，居群间的变异为6．13％。基因流(Nm)为3．8283，Nm>1，结果显示，赤皮青冈居群间的基因流水平可以防止遗传漂变的作用，降低局部产生的变异，维系居群间的相似性。4、7个居群遗传距离的聚类结果表明，地理距离较近的居群聚在一起，居群间遗传距离的大小与居群间地理距离的远近有一定的相关性。居群间遗传距离(D)值在O．0260,-0．1596之间，其中湖南永定居群和湖南桑植居群的遗传距离最小，湖南靖州和浙江庆元的遗传距离最大，这些结果显示，赤皮青冈居群地理距离的远近是影响居群遗传变异的主要因素。5、对现有赤皮青冈7个居群的ISSR

8、遗传多样性和遗传结构的分析结果表明，赤皮青冈资源匮乏的主要原因不是来自遗传变异，而是来自人为的干扰和生境的破