石油降解菌的筛选及降解条件的优化

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1、万方数据论文题目：至塑堕笙堕箜堕兰墨堕堡墨堡竺垡堡指导教师：协助指导教师：杨立琼型!堕塑墼堡单位：论文答辩日期：2014年12月25日学位授予单位：沈阳大学沈阳大学万方数据AMaster’SThesisinEnvironmentalScienceandEngineeringIsolationofPetroleumDegradationBacteriaandOptimizationofConditionsforDegradationCandidate：YangLiqiongSupervisor：ProfessorSunLinaSchoolofMechanicalEngineeringShenya

2、ngUniversityDecember25，2014万方数据独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得沈阳大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：轻必二日期：坦!竺：丝：丝二关于论文使用授权的说明本人完全了解沈阳大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或

3、其他复制手段保存论文。(保密的论文在解密后应遵循此规定)签名：社导师签名：避日期：趾万方数据摘要石油污染伴随着石油工业的发展呈现了日益严重的趋势，对人类健康和环境安全造成了严重的威胁和破坏。而微生物修复技术以其安全无二次污染、来源广泛和处理效果良好等优点成为近年的研究热点。虽石油烃降解菌广泛的存在于自然界中，但其生长和降解能力也受到很多因素的影响，如温度、pH、污染物浓度等。本文首先分别从苏州溶剂厂土壤和落地油污染土壤中筛选出5种具有较强降解能力的菌株，分别命名为S1、S3、S7、N1和N2，通过形态观察和一系列生理生化实验初步鉴定Sl、N1和N2均为假单胞菌属(Pseudomonas)，S3

4、为芽孢杆菌属(BacillusCohn)，S7为黄杆菌属(Flavobacteriuml。然后利用红外光度法和高效液相色谱法检测总石油烃和多环芳烃的含量，得到单一菌株降解率分别为59．75％、45．89％、62．35、51．8％和35．7％，混合菌株降解率S1+$7为71．6％，S1+$3为59．2％，S3+S7为61．95％，S1+S3+S7为65％，N1+N2为52．3％。混合菌群的降解率高于单菌株降解率，且其中S7和N1对多环芳烃类物质也具有良好的降解效果，综合性较好，其他三株更偏向于降解烷烃类物质。最后通过单因素实验优化各菌株的降解条件，验证其与最适生长条件的关系，并对比不同环境下菌株

5、的降解效果。初步探索了固体分散体及低温对降解效率的影响。得到5种菌株在土壤中的最适降解温度分别为29。C、29。C、30℃、30*C和290C：最适pH分别为7、7、7、8、8；最适氮源分别为KN03、KN03、NH4N03、KN03、KN03；最适磷源均为K2HP04+KHzP04(1：1混合)；最适氮源浓度均为750mg／L；最适磷源浓度均为200mg／L；最适土壤含水率分别为25％'-'--'30％、25％、25％--～30％、20％、20％；最适菌种的接种浓度均为15％；最适培养时间分别为13、11、12、13和12天：添加无机盐培养基降解效果较好。5种菌株在无机含油培养基中的最适降解

6、温度分别为30℃、30℃、30℃、29℃和30℃：最适pH均为8；最适氮源均为KN03；最适磷源均为K2HP04+KH2P04(1：1混合)；最适氮源浓度均为750mg／L；最适磷源浓度均为200mg／L；最适菌种的接种浓度分别为15％、15％、10％、10％、15％；最适培养时间分别为11、10、11、11和T万方数据沈阳大学硕士学位论文10天；最适石油浓度分别为600～1000mg／kg、600mg／kg、600"---"1000mg／kg、2000mg／kg、1000mg／kg。经对比发现最适降解条件与最适生长条件并不完全一致。菌体在培养基中的降解效果整体好于土壤中，但降解率在土壤中的变

7、化幅度小于培养基。且固体分散体聚乙二醇对菌株的降解率有所提升，降解有效性可低至15℃。综合各最适条件后单一菌株对苏州溶剂厂土壤和落地油中总石油烃降解率分别提高约30％和20％，混合菌株降解率分别提高20％'-'-'30％和10％，对多环芳烃降解率提高约6％"--'12％。关键词：石油烃Illlll，筛选，生长条件，降解条件。优化万方数据IsolationofPetroleumDegradation