黄芩茎叶总黄酮对高糖致血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其机制研究

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1、曲珍黄芩茎叶总黄酮对高糖致血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其机制研究目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12第一部分高糖致VSMCs异常增殖的作用及其机制研究实验一高糖对VSMCs的促增殖作用1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、142实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯153实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯194讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24实验二高糖对VSMCsSOD活性、MDA含量及AR表达的影响1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯262实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯334讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38第二部分SSTF抗高糖致VSMCs异

3、常增殖的作用及机制研究1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯402实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯403实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯424讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48全文结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯59攻读学位期间发表的论文

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61扬州大学硕士学位论文2背景：黄芩茎叶总黄酮对高糖致血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其机制研究摘要糖尿病(diabetesmellitus，DM)是多种心血管疾病的共同病理基础，严重威胁着人们的健康。糖尿病往往伴随并发症，糖尿病慢性并发症(DCC)以心血管并发症较多，是患者的主要死因。血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells，VSMCs)异常增殖是DCC发生的重要环节及重要机制，高浓度葡萄糖(1lighco

5、ncentrationofglucose，HG)fi皂*U激VSMCs异常增殖。多元醇通路(PP)是组织细胞葡萄糖的主要代谢途径之一，醛糖还原酶(AR)是该途径的限速酶，高糖刺激下PP激活是DCC病发的机制之一。研究表明，高浓度葡萄糖通过激活多元醇通路刺激VSMCs异常增殖，从而导致DCC。黄酮类化合物能抑制高糖诱导的VSMCs增殖，具有抗氧化、抑制AR表达的作用，黄芩茎叶总黄酮(Scutellariabaicalensisstemrleaftotalflavonoid，SSTF)是黄芩茎叶的提取物，其主要成分为黄酮类化合物，SSTF对心

6、脑血管系统具有普遍药理作用。研究表明，黄酮类化合物通过作用于多元醇通路抑制高糖诱导的VSMCs增殖。那么，SSTF对HG诱导的血管平滑肌细胞增殖是否具有抑制作用?其作用机制是否与抑制AR表达有关?目前有关这方面的研究国内外还未见报道。本研究在细胞水平观察SSTF对高糖致VSMCs增殖的抑制作用，并对其可能的作用机制进行了初步探讨，为SSTF防治DCC提供新的实验依据。目的：1．建立高糖致大鼠胸主动脉血管平滑肌细Pfl亚(VSMCs)增殖的模型并观察高糖对醛糖还原酶(art)表达的影响。2．观察黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对高糖所致VSMCs

7、增殖的抑制作用，并从分子水平探究其可能的作用机制。方法：1．高糖致VSMCs异常增殖模型的建立：体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，加入浓度梯度(5．5、10、20、30、40、50mmol／L)的葡萄糖的作用于VSMCs，分别在24h、48h、曲珍黄芩茎叶总黄酮对高糖致血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其机制研究72h、96h，使用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定各实验组细胞活力(OD值)；划痕实验检测细胞迁移能力；流式细胞仪(FCM)检测细胞增殖周期及增殖指数，观察高糖对VSMCs的促增殖作用，并确定高糖的最佳作用浓度和作用时间。2．

8、高糖对SOD活性、MDA含量及醛糖还原酶(AR)表达的影响：用浓度梯度的葡萄糖诱导VSMCs增殖，实验分为正常对照组(5．5mmol／L)及高浓度葡萄糖作用组(10、20、30、40、50mm